研究快报
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世界华人消化杂志. 2016-04-18; 24(11): 1708-1713
Published online 2016-04-18. doi: 10.11569/wcjd.v24.i11.1708
GCS通过影响bcl-2的表达介导结肠癌细胞的多药耐药
宋敏, 韩雪, 任秀花, 孟宇, 张顺同
宋敏, 韩雪, 孟宇, 张顺同, 郑州大学第一附属医院肿瘤科 河南省郑州市 450052
任秀花, 郑州大学基础医学院人体解剖学教研室 河南省郑州市 450001
宋敏, 主要从事消化系肿瘤的基础与临床方面的研究.
作者贡献分布: 此课题由宋敏、韩雪及孟宇设计; 研究过程由韩雪与张顺同完成; 任秀花负责实验指导; 宋敏与孟宇负责论文指导与修改; 数据分析和论文撰写由韩雪完成.
通讯作者: 宋敏, 教授, 主任医师, 450052, 河南省郑州市二七区建设路1号, 郑州大学第一附属医院肿瘤科. minsong2011@163.com
收稿日期: 2016-01-27
修回日期: 2016-03-07
接受日期: 2016-03-13
在线出版日期: 2016-04-18
Abstract

目的: 本文旨在通过检测在不同条件下结肠癌耐药细胞HCT-8/VCR及其敏感株细胞HCT-8中葡萄糖神经酰胺合成酶(glucosylceramide synthase, GCS)、bcl-2及细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases, ERK)的表达, 探讨其相互关系及可能的作用机制.

方法: 将细胞分为3组, A组: 结肠癌敏感细胞HCT-8常规培养; B组: 耐药细胞HCT-8/VCR加VCR 1 μg/mL培养, 维持其耐药性; C组: GCS抑制剂PPMP处理耐药细胞HCT-8/VCR. Western blot检测各组细胞中GCS、bcl-2及ERK蛋白水平的表达. 实时定量PCR检测(real-time quantitative PCR, qRT-PCR)检测GCS、ERK、bcl-2基因表达情况.

结果: 与敏感细胞相比, 多药耐药(multidrug resistance, MDR)细胞中GCS与bcl-2的mRNA和蛋白表达量明显升高(P<0.05), PPMP处理HCT-8/VCR细胞, GCS蛋白和mRNA的表达受到明显抑制(P<0.05), 同时bcl-2蛋白及mRNA的表达也明显下降(P<0.05), ERK蛋白的表达量在加入PPMP后也较前下降(P<0.05).

结论: GCS通过影响抗凋亡蛋白bcl-2的表达, 从而介导结肠癌细胞MDR, 这一过程可能是通过ERK信号通路完成的. 加入GCS抑制剂PPMP, 可抑制bcl-2的表达, 逆转细胞耐药.

Keywords: 葡萄糖神经酰胺合成酶; 结肠癌; 多药耐药; 细胞外调节蛋白激酶

核心提示: 肿瘤细胞的多药耐药(multidrug resistance, MDR)与细胞中葡萄糖神经酰胺合成酶(glucosylceramide synthase, GCS)含量的变化有着密切的关系, 实验通过干预并观察耐药组与非耐药组细胞中GCS、bcl-2、细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases, ERK)蛋白及基因表达的变化, 推断GCS通过ERK信号通路调节bcl-2的表达, 从而介导细胞耐药, 为进一步研究肿瘤MDR提供理论依据.