研究快报
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世界华人消化杂志. 2015-03-28; 23(9): 1460-1464
Published online 2015-03-28. doi: 10.11569/wcjd.v23.i9.1460
顺铂对结肠癌细胞株Caco-2增殖凋亡和Bcl-2、Caspase3、Caspase9蛋白表达的影响
李世清, 陈福敏, 罗君, 陈龙, 齐曼
李世清, 陈福敏, 罗君, 陈龙, 川北医学院第二临床学院-南充市中心医院消化内科 四川省南充市 637000
齐曼, 河北省承德市中心医院放化疗中心 河北省承德市 067000
李世清, 讲师, 主要从事结肠癌的发病机制及防治的研究.
作者贡献分布: 李世清负责论文研究的设计和论文写作; 陈福敏负责文章的审核、校对及论文写作指导; 罗君与齐曼负责资料收集; 陈龙负责实验研究.
通讯作者: 李世清, 讲师, 637000, 四川省南充市人民南路97号, 川北医学院第二临床学院-南充市中心医院消化内科. songman3423@126.com
电话: 0817-2258747
收稿日期: 2014-11-11
修回日期: 2015-01-23
接受日期: 2015-01-30
在线出版日期: 2015-03-28
Abstract

目的: 探讨顺铂(顺式二氨二氯铂)(cis-dichlorodiamineplatinum, DDP)对人结肠癌Caco-2细胞凋亡及相关蛋白Bcl-2、Caspase9、Caspase3表达的影响.

方法: 体外培养结肠癌Caco-2细胞; 检测不同浓度DDP干预下MTT染色的A值, 判定其对人结肠癌细胞恶性增殖的影响; 不同浓度DDP对人结肠癌细胞凋亡的影响使用流式细胞仪进行检测, Western blot检测不同浓度DDP对人结肠癌细胞内Bcl-2蛋白的表达; 应用分光光度法检测不同浓度DDP对人结肠癌细胞内Caspase9、Caspase3蛋白活性的影响.

结果: (1)癌细胞增殖结果显示, 在一定的作用时间范围内, Caco-2细胞存活率与DDP浓度呈负相关, 具有剂量依赖性, 其中4.000、2.000 µg/mL干预的各组细胞抑制率最显著, 差异均有统计学意义(P<0.05). 而低剂量组0.250、0.125 µg/mL及对照DMSO干预组细胞存活率比较差异均无统计学意义(P>0.05), 其细胞存活率明显高于其他各浓度组, 差异有统计学意义(P<0.01); (2)流式细胞仪检测结果显示: DDP能诱导Caco-2细胞的凋亡, 其诱导凋亡的效果呈时间和剂量性依赖; (3)Western blot检测结果显示: Bcl-2蛋白在结肠癌Caco-2细胞中低表达, DDP干预Caco-2细胞72 h后, 与对照组比较, Bcl-2蛋白表达明显下降(P<0.05). Caspase9、Caspase3在Caco-2细胞中低表达, DDP干预Caco-2细胞48、72 h后, 与对照组比较, Caspase9、Caspase3表达明显升高(P<0.01).

结论: 顺铂可以抑制Caco-2细胞增殖、诱导Caco-2细胞凋亡, 其机制可能与活化Caco-2细胞中Caspase9、Caspase3蛋白以及抑制Bcl-2蛋白表达有关.

Keywords: 顺铂; 人结肠癌; Bcl-2; Caspase9; Caspase3; 细胞凋亡

核心提示: 顺铂可以抑制Caco-2细胞增殖、诱导Caco-2细胞凋亡, 其机制可能与活化Caco-2细胞中Caspase9、Caspase3蛋白以及抑制Bcl-2蛋白表达有关.