基础研究
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世界华人消化杂志. 2015-03-28; 23(9): 1402-1410
Published online 2015-03-28. doi: 10.11569/wcjd.v23.i9.1402
急性肝衰竭大鼠高迁移率族蛋白B1的变化和意义
张宇, 王刚, 祝文彩, 陈钟
张宇, 王刚, 陈钟, 南通大学附属医院肝胆外科 江苏省南通市 226000
祝文彩, 南通大学附属医院检验科 江苏省南通市 226000
张宇, 住院医师, 主要从事急性肝衰竭的研究.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 81070360; 江苏省研究生创新计划基金资助项目, No. CXZZ13_0876; 南通大学研究生创新计划基金资助项目, No. ykc13074.
作者贡献分布: 张宇与陈钟对此文所作贡献均等; 此课题由陈钟与张宇设计; 研究过程由张宇与王刚操作完成; 数据分析由张宇完成; 部分检测由祝文彩完成; 本论文写作由陈钟与张宇完成.
通讯作者: 陈钟, 教授, 主任医师, 226000, 江苏省南通市西寺路20号, 南通大学附属医院肝胆外科. chenz9806@163.com
电话: 0513-81161006
收稿日期: 2014-12-23
修回日期: 2015-01-23
接受日期: 2015-01-29
在线出版日期: 2015-03-28
Abstract

目的: 比较高迁移率族蛋白B1(high mobility group protein B1, HMGB1)与其他炎症因子在急性肝衰竭(acute liver failure, ALF)大鼠肝组织和血清中出现时间及持续时间, 探讨其来源及作用.

方法: 采用腹腔内注射D-氨基半乳糖(D-galactosamine, D-Gal)和脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)制备大鼠ALF模型, 以腹腔内注射生理盐水作为对照组. 于注射后3、6、12、24、48、72 h检测血清中肝功能的变化, 观察肝组织病理, 实时荧光定量PCR检测肝组织中HMGB1、白介素1β(interleukin 1β, IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α) mRNA变化, ELISA法检测血清中HMGB1、IL-1β、IL-6、TNF-α水平变化, 免疫组织化学检测肝组织中HMGB1表达变化. 使用重组高迁移率族蛋白B1(recombinant high mobility group protein 1, rHMGB1)单独尾静脉注射或联合D-Gal、LPS腹腔内注射, 观察大鼠的一般情况并计算生存率.

结果: 采用D-Gal和LPS成功建立大鼠ALF模型. ALF大鼠肝组织中HMGB1 mRNA表达和血清中HMGB1水平高峰均较IL-1β、IL-6、TNF-α出现晚, 但其高峰持续时间更长. D-Gal和LPS注射后的3 h, 免疫组织化学可见肝细胞中HMGB1由细胞核转移到细胞质中; 注射后24-48 h, 肝脏正常组织结构消失, HMGB1蛋白自坏死的肝细胞被动释放. 添加外源性rHMGB1使大鼠死亡时间提前, ALF大鼠在相同时间点死亡率升高.

结论: 大鼠ALF过程中HMGB1由坏死的肝细胞被动释放, 其出现时间较其他炎症因子为晚. HMGB1与其他炎症因子相互作用, 可能进一步促进ALF中的炎症反应.

Keywords: 高迁移率族蛋白B1; 急性肝衰竭; 炎症因子; 全身炎症反应综合症

核心提示: 大鼠急性肝衰竭(acute liver failure, ALF)过程中高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1 protein, HMGB1)由坏死的肝细胞被动释放, 其出现时间较其他炎症因子为晚. HMGB1与其他炎症因子相互作用, 可能进一步促进ALF中的炎症反应. HMGB1有希望作为治疗肝衰竭的有效靶点, 为阻止器官损伤的发展起到保护作用, 为临床治疗提供更充裕的时间.