研究快报
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世界华人消化杂志. 2015-03-08; 23(7): 1115-1120
Published online 2015-03-08. doi: 10.11569/wcjd.v23.i7.1115
miR-214负向调控结肠癌细胞株LoVo中Sema4D的表达
刘洋, 周红林, 侯友芳, 张捷
刘洋, 周红林, 侯友芳, 昆明医科大学第二附属医院妇科 云南省昆明市 650101
张捷, 昆明医科大学第二附属医院肝胆外科 云南省昆明市 650101
刘洋, 主治医师, 在读博士, 主要从事妇科肿瘤与生殖内分泌的研究.
基金项目: 2014云南省教育厅科研基金重点资助项目, No. 2014Z075.
作者贡献分布: 刘洋、周红林及侯友芳对此文所作贡献均等; 此课题由刘洋、周红林、侯友芳及张捷设计; 研究过程由刘洋、周红林及侯友芳共同操作完成; 研究所用新试剂及分析工具由张捷提供; 数据分析由刘洋、周红林及侯友芳共同完成; 本论文写作由刘洋、周红林、侯友芳及张捷共同完成.
通讯作者: 张捷, 教授, 主任医师, 650101, 云南省昆明市滇缅大道374号, 昆明医科大学第二附属医院肝胆外科. 24069343@qq.com
电话: 0871-65351281
收稿日期: 2015-01-08
修回日期: 2015-02-02
接受日期: 2015-02-06
在线出版日期: 2015-03-08
Abstract

目的: 观察miR-214对人结肠癌细胞株LoVo中轴突导向因子4D(semaphorin 4D, Sema4D)表达水平的影响, 探讨miR-214对Sema4D的调控作用.

方法: 设计并合成miR-214模拟物(miR-214 mimics), miR-214抑制剂(miR-214 inhibitor), 二者对照序列(mi-control, in-control), 分别与以脂质体lipofectamine 2000包裹后转染人结肠癌细胞株LoVo. RT-PCR检测转染24 h后各细胞株内miR-214的表达及Sema4D mRNA的表达变化, 并用Western blot检测Sema4D蛋白的表达变化.

结果: LoVo细胞株转染miR-214 mimics、mi-control, inhibitor、in-control 24 h后miR-214的相对表达量为8.003±0.651, 3.464±0.332, 0.740±0.088, 2.620±0.166, mimics组miR-214表达较其对照组升高, inhibitor组表达较其对照组降低(P<0.05). Sema4D mRNA的相对表达量为: 0.420±0.027, 0.851±0.062, 1.243±0.087, 0.660±0.042; Sema4D蛋白/β-actin分别为: 0.163±0.037, 0.550±0.038, 1.137±0.112, 0.457±0.046. Sema4D mRNA及蛋白mimics组表达较其对照组降低, inhibitor组较其对照组升高(P<0.05).

结论: 人结肠癌细胞株LoVo中, Sema4D受miR-214的调控, miR-214可负向调控Sema4D mRNA的表达水平进而影响其蛋白的表达. miR-214可能作为结肠癌治疗的新靶点.

Keywords: miR-214; 轴突导向因子4D; 结肠癌; LoVo

核心提示: 探讨了在结肠癌细胞株LoVo中, miR-214对轴突导向因子4D(semaphorin 4D, Sema4D)的负性调控作用, 证明了Sema4D能被miR-214负性调控. 对阐明miR-214的作用机制以及结肠癌的治疗提供重要的理论依据.