临床经验
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世界华人消化杂志. 2015-10-18; 23(29): 4713-4719
Published online 2015-10-18. doi: 10.11569/wcjd.v23.i29.4713
基于不同引物的16S rRNA序列分析法对SBP腹水细菌的鉴定及抗感染疗效评价的意义
赵莹莹, 邢卉春
赵莹莹, 邢卉春, 首都医科大学附属北京地坛医院肝病三科 北京市 100015
赵莹莹, 医师, 主要从事慢性病毒性肝炎及相关肝病发病机制及临床诊治研究.
基金项目: 首都医学发展科研基金资助项目, No. 2007-3054; 国家自然科学基金资助项目, No. 81201160; 国家科技重大专项课题资助项目, No. 2014ZX10005001.
作者贡献分布: 赵莹莹与邢卉春对此文所作贡献均等; 此课题由邢卉春设计; 研究过程由赵莹莹操作完成; 研究所用新试剂及分析工具由邢卉春提供; 数据分析由赵莹莹与邢卉春完成; 本论文写作由赵莹莹与邢卉春完成.
通讯作者: 邢卉春, 教授, 主任医师, 100015, 北京市朝阳区京顺东街8号, 首都医科大学附属北京地坛医院肝病三科. hchxing@sohu.com
电话: 010-84322291
收稿日期: 2015-08-09
修回日期: 2015-09-13
接受日期: 2015-09-21
在线出版日期: 2015-10-18
Abstract

目的: 探讨联合单独或联合应用2对不同引物的16S rRNA序列分析法, 能否提高自发性细菌性腹膜炎(spontaneous bacterial peritonitis, SBP)腹水细菌检测的敏感性及准确性, 并且通过其检测细菌的结果来评价抗感染治疗效果.

方法: 收集77例肝硬化失代偿期合并腹水的标本, 其中SBP 61例, 非SBP 16例, 应用2对不同引物(MSQ-F/MSQ-R与27F/1492R)的组合, 对腹水细菌分别进行16S rRNA序列分析, 对腹水进行常规化验、细菌培养及生化方法鉴定细菌, 分析单独或联合应用2对不同引物的16S rRNA序列分析法在鉴定SBP腹水细菌中的应用价值, 并对腹水细菌状态进行动态评价.

结果: 与腹水细菌培养、生化鉴定的细菌结果相比, 16S rRNA序列分析法鉴定细菌的结果与之的符合率: 单用引物MSQ-F/MSQ-R: 属的符合率73.33%(11/15), 种的符合率66.67%(10/15); 单用27F/1492R引物: 属的符合率80.00%(12/15), 种的符合率73.3%(11/15); 引物MSQ-F/MSQ-R联合27F/1492R: 属的符合率86.67%(13/15), 种的鉴定的符合率80.00%(12/15), 应用2对引物的组合进行16S rRNA序列分析鉴定细菌, 可以得到更高的准确率. 5例SBP患者(腹水细菌培养阳性组2例, 临床感染组3例)经抗感染治疗后, 腹水细菌培养阴性, 但临床感染控制不理想的患者, 16S rRNA序列分析法检测腹水细菌仍为阳性.

结论: 联合应用2对不同引物的16S rRNA序列分析法, 可以提高SBP腹水细菌的鉴定能力, 并且可以动态应用于临床进行抗感染疗效评价.

Keywords: 不同引物; 16S rRNA序列分析; 自发性细菌性腹膜炎; 细菌鉴定; 抗感染疗效评价

核心提示: 本研究中应用2对不同的16S rRNA基因通用引物的组合, 对腹水细菌进行检测、鉴定, 结果发现该方法可提高自发性细菌性腹膜炎(spontaneous bacterial peritonitis)腹水细菌的鉴定能力; 可以检测抗生素治疗前后腹水的细菌, 能动态检测抗感染的效果, 评价抗感染治疗疗效.