基础研究
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世界华人消化杂志. 2015-09-28; 23(27): 4335-4341
Published online 2015-09-28. doi: 10.11569/wcjd.v23.i27.4335
MicroRNA-486-5p通过下调Neuropilin-2的表达抑制人大肠癌中微淋巴管的生成
刘成霞, 马锋振, 王健, 李锟, 李琼, 连海峰
刘成霞, 马锋振, 王健, 李锟, 李琼, 连海峰, 滨州医学院附属医院消化内科 山东省滨州市 256603
刘成霞, 教授, 主任医师, 主要从事大肠肿瘤发病机制的基础研究.
基金项目: 山东省自然科学基金资助项目, No. ZR2014HQ072; 山东省医药卫生科技发展计划基金资助项目, No. 2014WS0490; 滨州市科技发展计划基金资助项目, No. 2014ZC0116.
作者贡献分布: 刘成霞与连海峰对此论文所作贡献均等; 此课题由刘成霞与连海峰设计; 研究过程由马锋振与王健操作完成; 数据分析由李锟与李琼完成; 本论文写作由刘成霞完成.
通讯作者: 连海峰, 主治医师, 256603, 山东省滨州市黄河二路661号, 滨州医学院附属医院消化内科. lianhaifeng01@163.com
收稿日期: 2015-07-31
修回日期: 2015-08-23
接受日期: 2015-08-26
在线出版日期: 2015-09-28
Abstract

目的: 探讨过表达microRNA-486-5p(miR-486-5p)对人大肠癌细胞系SW620体内生长的作用及其作用机制的研究.

方法: 构建miR-486-5p的过表达质粒, 体外脂质体法瞬时转染人大肠癌细胞SW620; 建立人大肠癌裸鼠皮下移植瘤模型, 实验组每3 d瘤周注射miR-486-5p过表达质粒, 对照组注射等量的空白载体. 每天观察肿瘤的生长情况并每3 d测量肿瘤的体积; 实时荧光定量-PCR(Real-time PCR)检测各组肿瘤组织中miR-486-5p的表达水平; 免疫组织化学技术检测移植瘤内神经纤毛蛋白-2(neuropilin-2, NRP2)及微淋巴管的的分布情况; Western blot技术检测各组移植瘤中NRP2蛋白的表达.

结果: 转染后, 实验组中miR-486-5p的相对表达量较对照组提高12.57±2.31倍, 过表达miR-486-5p后实验组裸鼠皮下移植瘤的生长速度较对照组明显减缓(P<0.05), 瘤体质量明显减轻(P<0.05). 过表达miR-486-5p可明显抑制NRP2蛋白的表达(P<0.05), 此外, miR-486-5p组微淋巴管密度降低.

结论: 过表达miR-486-5p可明显抑制大肠癌细胞的生长, 抑制微淋巴管的生成, 这可能与下调NRP2蛋白的表达有关.

Keywords: 大肠癌; miR-486-5p; 淋巴管生成; 神经纤毛蛋白-2

核心提示: 本研究通过裸鼠皮下移植瘤模型的建立, 探讨miRNA-486-5p在大肠癌的发展及转移过程中的作用, 上调miRNA-486-5p的表达量后, Western blot及免疫组织化学均表明miR-486-5p可抑制神经纤毛蛋白-2(neuropilin-2)的表达, 同时, miR-486-5p表达上调可以抑制微淋巴管的生成从而抑制大肠癌的淋巴结转移.