Copyright
©The Author(s) 2015. Published by Baishideng Publishing Group Inc. All rights reserved.
世界华人消化杂志. 2015-08-18; 23(23): 3749-3754
Published online 2015-08-18. doi: 10.11569/wcjd.v23.i23.3749
Published online 2015-08-18. doi: 10.11569/wcjd.v23.i23.3749
上调miR-203表达对肝星状细胞增殖及胶原合成的影响
胡丹平, 胡益冰, 徐旺旺, 徐婷燕, 付荣泉, 温州医科大学附属第三医院感染科 浙江省瑞安市 325200
倪顺兰, 温州医科大学附属第一医院感染科 浙江省温州市 325000
胡丹平, 在读硕士, 主要从事肝纤维化机制研究.
基金项目: 浙江省自然科学基金资助项目, No. Y14H030042.
作者贡献分布: 此课题由付荣泉设计; 研究过程由胡丹平、胡益冰及徐旺旺操作完成; 实验数据整理分析由徐婷燕与倪顺兰完成; 论文由胡丹平与付荣泉撰写完成.
通讯作者: 付荣泉, 副主任医师, 博士, 325200, 浙江省瑞安市万松路108号, 温州医科大学附属第三医院感染科. frq6688@126.com
收稿日期: 2015-06-22
修回日期: 2015-07-21
接受日期: 2015-07-24
在线出版日期: 2015-08-18
修回日期: 2015-07-21
接受日期: 2015-07-24
在线出版日期: 2015-08-18
Abstract
目的: 观察上调miR-203表达对肝星状细胞增殖活性及胶原合成的影响.
方法: 利用Lipofectamine™ 2000将miR-203模拟物(mimics)转染大鼠肝星状细胞(HSC-T6), 培养48 h后, 收集细胞提取总蛋白和总RNA, 分别行Western blot和RT-qPCR, 检测α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SMA)、Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原表达; MTT(噻唑蓝)法检测细胞增殖活性.
结果: 与阴性对照组相比, miR-203 mimics组α-SMA蛋白和mRNA表达分别下降75%和80%(均P<0.01); Ⅰ型胶原蛋白表达下降56%(P<0.01), mRNA表达下降48%(P<0.05); Ⅲ型胶原蛋白与mRNA表达分别下降45%和60%(P<0.05); HSC-T6细胞增殖活性下降20%±5%(P<0.01).
结论: 上调miR-203表达能显著抑制肝星状细胞增殖及胶原合成.
Keywords: 微小RNA-203; 肝星状细胞; α平滑肌肌动蛋白; Ⅰ型胶原; Ⅲ型胶原; 增殖
核心提示: 上调miR-203表达可以明显抑制肝星状细胞增殖活性, 降低胶原合成的能力, 根据本研究结果及以往世界范围内研究显示miR-203在肝纤维化形成过程中起到负调控的作用.