基础研究
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世界华人消化杂志. 2015-08-18; 23(23): 3670-3682
Published online 2015-08-18. doi: 10.11569/wcjd.v23.i23.3670
CX3CR1对骨髓间充质干细胞修复受损肠上皮细胞的影响
曹毅, 刘涛, 尹明丽, 张博雅, 宋红丽
曹毅, 尹明丽, 张博雅, 天津医科大学一中心临床学院 天津市 300070
刘涛, 宋红丽, 天津市第一中心医院器官移植科 天津市器官移植重点实验室 天津市 300192
曹毅, 在读硕士, 主要从事消化系统疾病的研究.
基金项目: 国家自然基金面上基金资助项目, Nos. 81270528, 81441022; 天津市应用基础及前沿技术研究计划(重点)基金资助项目, Nos. 11JCZDJC27800, 12JCZDJC25200; 天津市卫生局科技基金(攻关)资助项目, No. 2011KY11.
作者贡献分布: 此课题由宋红丽设计; 实验由曹毅完成, 刘涛、尹明丽及张博雅协助完成; 统计分析由曹毅完成; 论文撰写由曹毅完成; 论文审校由宋红丽完成.
通讯作者: 宋红丽, 教授, 主任医师, 300192, 天津市南开区复康路24号, 天津市第一中心医院器官移植科, 天津市器官移植重点实验室. hlsong26@163.com
电话: 022-23626928
收稿日期: 2015-05-04
修回日期: 2015-07-02
接受日期: 2015-07-13
在线出版日期: 2015-08-18
Abstract

目的: 探讨趋化因子受体CX3CR1对骨髓间充质干细胞(bone marrow-mesenchymal stem cells, BM-MSCs)修复受损肠上皮细胞的影响.

方法: 体外分离培养、鉴定BM-MSCs. 采用肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor alpha, TNF-α)处理结肠癌上皮细胞(colon adenocarcinoma epithelial cell line, Caco-2)建立肠上皮损伤模型. 实验分为6组: (1)单纯BM-MSCs组; (2)单纯Caco-2组; (3)Caco-2+TNF-α组; (4)BM-MSCs+Caco-2组; (5)BM-MSCs+Caco-2+TNF-α组; (6)anti-CX3CR1-BM-MSCs+Caco-2+TNF-α组, 利用Transwell培养板将各组共培养, 通过免疫荧光、Western blot及荧光定量RT-PCR方法检测Caco-2上ZO-1(zonula occluden 1)、Occludin和BM-MSCs上CX3CR1蛋白及mRNA表达水平.

结果: 选择100 ng/mL TNF-α处理Caco-2细胞48 h建立损伤模型后, 检测ZO-1和Occludin表达水平明显降低(P<0.05). 在BM-MSCs与未受损的Caco-2共培养时ZO-1、Occludin和CX3CR1蛋白及mRNA的表达不受影响, 而在BM-MSCs与受损Caco-2共培养时, 其表达增加(P<0.05). 阻断CX3CR1后, ZO-1、Occludin蛋白及mRNA的表达与未阻断前相比明显减少(P<0.05).

结论: CX3CR1参与BM-MSCs对受损肠上皮的修复.

Keywords: 骨髓间充质干细胞; CX3CR1; Caco-2; 紧密连接蛋白; 趋化因子受体

核心提示: 本文应用肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor alpha)处理结肠腺癌Caco-2细胞, 成功建立肠黏膜上皮细胞损伤模型, ZO-1(zonula occluden 1)和Occludin表达水平明显降低, 将BM-MSCs和受损Caco-2共培养, ZO-1、Occludin和CX3CR1蛋白及mRNA的表达水平增加, 阻断CX3CR1后, ZO-1、Occludin蛋白及mRNA的表达与未阻断前相比明显减少, 揭示了CX3CR1能够参与骨髓间充质干细胞对受损肠上皮的修复作用.