溃疡性结肠炎大鼠结肠肌层突触小体相关蛋白25的表达变化

Abstract

目的: 观察溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, UC)大鼠结肠肌层分子量为25 kDa的突触小体相关蛋白(synaptosomal associated protein of 25 kDa, SNAP-25)的表达情况.

方法: 应用2,4-二硝基苯磺酸(2,4-dinitrobenzene sulfonic acid, DNBS)灌肠的方法制作大鼠UC模型, 免疫组织化学评估结肠肌层SNAP-25标记的神经轴突的密度, Western blot半定量检测肌层SNAP-25含量, HE染色法评价结肠炎症状态, 生化检测方法评价结肠匀浆髓过氧化物酶(myeloperoxidase, MPO)活力、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活力及丙二醛(malonaldehyde, MDA)含量的变化, 酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)法检测白介素1β(interleukin 1β, IL-1β)含量的变化.

结果: 在DNBS诱导的UC大鼠, 结肠肌层中SNAP-25标记的轴突密度减小为对照的22.60%(23.76个/百个平滑肌细胞±13.24个/百个平滑肌细胞 vs 5.37个/百个平滑肌细胞±1.96个/百个平滑肌细胞, P<0.01), 肠道肌层SNAP-25蛋白表达量减少为对照组的34.31%(P<0.01). 与对照组相比, 结肠组织中MPO活力增高(1.91 U/g wet weight±0.58 U/g wet weight vs 0.99 U/g wet weight±0.21 U/g wet weight, P<0.01) , SOD活力显著降低(4.11 U/mg protein±1.80 U/mg protein vs 9.01 U/mg protein±2.17 U/mg protein, P<0.01), MDA含量增高(1.72 nmol/mg protein±0.28 nmol/mg protein vs 1.11 nmol/mg protein±0.27 nmol/mg protein, P<0.01), IL-1β表达量增高(181.51 pg/mg protein±55.30 pg/mg protein vs 84.27 pg/mg protein±42.27 pg/mg protein, P<0.01).

结论: DNBS诱导的UC大鼠的结肠肌层SNAP-25蛋白表达量明显减少, 肠道组织炎症及氧化应激水平增高可能是其重要原因之一.

Keywords: 溃疡性结肠炎; 肠肌间神经元; 突触小体相关蛋白25; 炎症; 氧化应激

核心提示: 肠肌间神经元是肠道的重要组成部分, 与肠道的运动及感觉功能密切相关, 研究溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, UC)时肠肌间神经元的损伤及突触小体相关蛋白25的表达情况可更加深入的认识UC的病理状态及症状产生机制.