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世界华人消化杂志. 2015-07-18; 23(20): 3259-3264
Published online 2015-07-18. doi: 10.11569/wcjd.v23.i20.3259
Published online 2015-07-18. doi: 10.11569/wcjd.v23.i20.3259
TUNEL染色结合细胞形态学特点鉴别急性胰腺炎时腺泡细胞的死亡方式
胡洋洋, 周春华, 窦文欢, 凤辉, 王少峰, 苏州大学附属第二医院消化科 江苏省苏州市 215004
胡洋洋, 主要从事消化系统疾病的研究.
基金项目: 苏州市科技发展计划基金资助项目, No. SYS201471.
作者贡献分布: 本课题由胡洋洋、周春华及王少峰设计; 研究过程由胡洋洋与窦文欢完成; 试剂由凤辉提供; 论文写作由胡洋洋与凤辉完成; 文章审阅及修改由王少峰完成.
通讯作者: 王少峰, 主任医师, 215004, 江苏省苏州市金阊区三香路1055号, 苏州大学附属第二医院消化科. sfwang59@sina.cn
电话: 0512-67784806
收稿日期: 2015-04-24
修回日期: 2015-06-09
接受日期: 2015-06-19
在线出版日期: 2015-07-18
修回日期: 2015-06-09
接受日期: 2015-06-19
在线出版日期: 2015-07-18
Abstract
目的: 通过脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TdT-mediated dUTP nick labeling, TUNEL)染色检测大鼠急性胰腺炎(acute pancreatitis, AP)中腺泡细胞的死亡情况, 探讨TUNEL染色阳性细胞的形态与细胞死亡方式之间的关系.
方法: 大鼠随机分为ANP组和假手术组(sham operation, SO), 每组6只, 利用4%的牛磺胆酸钠胰胆管逆行注射建立大鼠急性坏死性胰腺炎(acute necrotizing pancreatitis, ANP)模型, 对两组大鼠胰腺组织进行病理学观察并采用TUNEL技术对胰腺组织切片进行染色, 光镜下观察TUNEL染色阳性细胞的形态学表现.
结果: 对比假手术组, ANP组大鼠胰腺组织出现典型的AP样病理改变, 同时可见大量的TUNEL染色阳性腺泡细胞. 阳性细胞之间的形态学特点各异, 其中既有细胞呈凋亡表现, 如核固缩和核破裂伴凋亡小体形成; 也有细胞呈坏死表现, 如核膨胀、核溶解以及胞质空泡化. 两种细胞死亡方式的形态学表现之间存在显著差异.
结论: AP时, TUNEL染色并不能很好地区分腺泡细胞的坏死与凋亡, 但其联合阳性染色细胞的形态学特征可初步鉴别两种细胞死亡方式.
Keywords: 急性胰腺炎; 脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记; 凋亡; 坏死
核心提示: 现有证据表明脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TdT-mediated dUTP nick labeling, TUNEL)在检测急性胰腺炎时腺泡细胞凋亡方面缺乏特异性. 本研究提示TUNEL染色结合细胞学形态特点可初步区分腺泡细胞的凋亡与坏死, 从而提高TUNEL染色在检测急性胰腺炎时腺泡细胞死亡反应中的特异性.