修回日期: 2014-11-21
接受日期: 2014-11-27
在线出版日期: 2015-01-18
目的: 分析糖原合酶激酶3β(glycogen synthase kinase 3β, GSK-3β)在雷公藤甲素(triptolide, TPL)诱导胰腺癌细胞AsPC-1凋亡中的作用.
方法: 体外培养胰腺癌细胞AsPC-1, 采用TPL处理AsPC-1细胞及采用GSK-3β抑制剂LiCl预处理AsPC-1, 流式细胞仪分析细胞凋亡情况及采用Western blot分析GSK-3β、p-糖原合酶激酶-3β(p-glycogen synthase kinase-3β, p-GSK-3β)及B细胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma-2, Bcl-2)等蛋白表达水平.
结果: 6.54 ng/mL及15.51 ng/mL TPL处理对AsPC-1细胞活性有显著的抑制作用, 分别为39.64%及52.19%, 经LiCl预处理后其抑制作用减弱为27.36%及41.94%; 采用LiCl预处理组的细胞凋亡情况较相应浓度未经LiCl预处理组AsPC-1细胞的凋亡率降低; 经TPL处理后AsPC-1细胞中p-GSK-3β水平显著增加, 而GSK-3β的表达水平无显著性变化; 采用LiCl预处理后AsPC-1细胞中p-GSK-3β的表达水平增加, GSK-3β的表达水平无显著性变化, 且凋亡相关因子Bcl-2、B细胞淋巴瘤-xl(B-cell lymphoma-xl, Bcl-xl)及髓样细胞白血病-1(myeloid cell leukemia-1, Mcl-1)的表达水平降低.
结论: p-GSK-3β水平增加能够抑制TPL诱导的胰腺癌细胞的凋亡.
核心提示: 本研究采用流式细胞仪及Western blot检测雷公藤甲素(triptolide, TPL)处理后的胰腺癌细胞凋亡及p-糖原合酶激酶-3β(p-glycogen synthase kinase-3β, p-GSK-3β)、B细胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma-2)以及GSK-3β蛋白表达. 提示TPL可能是通过调节凋亡相关基因p-GSK-3β蛋白的表达最终诱导胃癌细胞胰腺癌细胞凋亡的重要机制.