Published online 2015-04-28. doi: 10.11569/wcjd.v23.i12.1937
修回日期: 2015-03-10
接受日期: 2015-03-18
在线出版日期: 2015-04-28
目的: 用硫代乙酰胺(thioacetamide, TAA)灌胃法诱导大鼠形成肝纤维化, 建立一种稳定持久实用的大鼠肝纤维化模型.
方法: 将♂SD大鼠随机分为正常组和模型组, 模型组采用质量浓度为3%的TAA对SD大鼠进行隔天灌胃, 灌胃量为160 mg/kg体质量[灌胃体积(mL)为体质量(g)/187.5]; 正常组采用溶剂蒸馏水代替TAA灌胃. 灌胃6 wk后处死大鼠, 采集血清和肝组织, 血清分别进行肝功能(血氨、碱性磷酸酶、总胆红素、白蛋白/球蛋白)和细胞因子[肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor, HGF)、肝素结合表皮生长因子(heparin-binding epidermal growth factor, HB-EGF)、白介素-6(interleukin-6, IL-6)、α-平滑肌抗体(α-smooth muscle antibody, α-SMA)]水平检测, 肝组织分别进行HE和Masson染色, 并对纤维化程度进行病理分级. 留取部分成模大鼠, 停止灌服TAA 11 wk后, 取肝组织做HE染色, 观察肝纤维化自愈情况.
结果: TAA灌胃6 wk后, 大鼠肝纤维化形成率为100%. 与对照组相比, 模型组大鼠肝功能变化显著, 其中血氨、碱性磷酸酶和总胆红素浓度显著升高, 白蛋白/球蛋白比值显著降低(P<0.01); 血清中细胞因子HGF与HB-EGF水平显著降低, IL-6、α-SMA水平显著升高(P<0.01). 停用TAA 11 wk后, 与11 wk前相比, HE染色显示肝组织纤维化程度, 未见显著变化.
结论: TAA灌胃6 wk可以形成稳定和持久的肝纤维化, 肝纤维化形成率高且速度快, 是一种简便实用的肝纤维化模型制备方法.
核心提示: 目前, 最为常用的CCl4所导致的肝纤维化模型存在缺陷, 即自愈性, 一旦停药, 肝脏纤维化程度会逐渐减轻, 这个问题在观察药物的长期作用效果时尤为显著. 而硫代乙酰胺(thioacetamide)灌胃诱导的大鼠肝纤维化模型持久稳定, 无自愈性.