基础研究
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世界华人消化杂志. 2015-04-18; 23(11): 1728-1735
Published online 2015-04-18. doi: 10.11569/wcjd.v23.i11.1728
吞噬细胞的磷脂酰丝氨酸外翻与其血清依赖的调理作用的关系
陈辉, 邵红伟, 陆晓敏, 何免, 沈晗, 吴凤麟, 王辉, 黄树林
陈辉, 邵红伟, 陆晓敏, 何免, 沈晗, 吴凤麟, 王辉, 黄树林, 广东药学院生命科学与生物制药学院 广东省生物技术候选药物研究重点实验室 广东省广州市 510006
陈辉, 在读硕士, 主要从事免疫分子生物学方面的研究.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, Nos. 31100664, 31300737, 81303292; 广东省自然科学基金资助项目, Nos. 10151022401000024, S2012040007958.
作者贡献分布: 陈辉与邵红伟对此文所做贡献均等; 此课题由邵红伟设计; 研究过程由陈辉与陆晓敏操作完成; MDA检测由陆晓敏与何免操作完成; 吞噬实验由沈晗与吴凤麟操作完成; 部分数据分析由王辉与黄树林操作完成; 论文写作由陈辉与邵红伟完成.
通讯作者: 邵红伟, 副教授, 510006, 广东省广州市大学城外环东路280号, 广东药学院生命科学与生物制药学院, 广东省生物技术候选药物研究重点实验室. shaohongwei@gdpu.edu.cn
电话: 020-39352632
收稿日期: 2015-01-25
修回日期: 2015-02-17
接受日期: 2015-03-06
在线出版日期: 2015-04-18
Abstract

目的: 探讨外周血中单核吞噬细胞的磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine, PS)外翻与其血清依赖的调理作用之间的关系, 为探索生理微环境对于吞噬细胞功能的影响奠定基础.

方法: 基于Ficoll-paque密度梯度离心法分离外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMC), 经过PBS充分洗涤之后利用含有和不含血清的RPMI 1640培养基处理细胞, 一定时间之后利用Annexin V染色检测血清处理前后PS外翻的情况; 通过比色法检测胞膜丙二醛(malondialdehyde, MDA)的含量, 以考察脂质过氧化产物对Annexin V检测结果的影响; 通过anti-CD3、anti-CD56、anti-HLA-DR等不同的表面分子抗体染色, 利用流式分析PBMC中不同细胞群的PS外翻情况; 利用表达绿色荧光蛋白的细菌与PBMC共孵育, 通过流式细胞术检测细胞的吞噬能力.

结果: 流式分析表明PBMC经血清处理后PS+细胞比例明显升高, 并且这种升高发生在血清短暂的处理之后; 血清处理对于细胞膜MDA的含量没有显著影响, 排除了脂质过氧化对PS检测的影响; 针对PBMC的细胞表型分析表明HLA-DR+单核吞噬细胞是PBMC中对血清处理敏感的主要细胞亚群, 其在血清处理后Annexin V+细胞中的比例有显著的增加(P<0.05); 细菌吞噬实验表明外翻的PS参与了血清诱导的调理作用.

结论: 吞噬细胞PS外翻是血清依赖的, 并且这种外翻的PS参与了对细菌的调理作用.

Keywords: 吞噬细胞; 磷脂酰丝氨酸; 血清依赖的调理作用; 外翻

核心提示: 本文对单核吞噬细胞血清依赖的调理作用与其组成型的胞膜磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine, PS)外翻之间的联系进行了研究, 表明吞噬细胞胞膜的PS外翻是血清依赖的, 并且这种能够被血清孵育促进的外翻PS参与了对细菌的调理作用.