临床研究
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世界华人消化杂志. 2015-04-08; 23(10): 1585-1591
Published online 2015-04-08. doi: 10.11569/wcjd.v23.i10.1585
AGR2调控IFITM3的表达促进肝癌细胞的增殖
冯潜, 周勇, 石世代, 李恩亮, 吴荣寿, 李科浩, 邬林泉
冯潜, 周勇, 石世代, 李恩亮, 吴荣寿, 李科浩, 邬林泉, 南昌大学第二附属医院肝胆外科 江西省南昌市 330006
冯潜, 主要从事肝胆外科临床和肝脏肿瘤方面的研究.
基金项目: 江西省教育厅基金资助项目, No. GJJ14056.
作者贡献分布: 本课题由冯潜与邬林泉设计; 研究过程由冯潜、周勇、石世代、李恩亮、吴荣寿及李科浩完成; 数据分析由冯潜完成; 本论文写作由冯潜与邬林泉完成.
通讯作者: 邬林泉, 教授, 330006, 江西省南昌市民德路1号, 南昌大学第二附属医院肝胆外科. wulqnc@163.com
电话: 0791-86259631
收稿日期: 2015-01-12
修回日期: 2015-01-29
接受日期: 2015-02-09
在线出版日期: 2015-04-08
Abstract

目的: 探讨重组人前梯度同源蛋白2(anterior gradient homolog 2, AGR2)的表达对肝癌细胞增殖能力的影响及其可能的作用机制.

方法: 通过实时荧光定量PCR、Western blot、免疫组织化学检测40例肝癌患者癌组织和对应癌旁组织中AGR2基因、干扰素诱导跨膜蛋白3(interferon-induced transmembrane protein 3, IFITM3)的表达情况, 构建AGR2的过表达质粒pcDNA3.1-AGR2, 并将其转染至肝癌细胞中, 运用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法分别检测AGR2 mRNA和蛋白的表达, CCK-8(cell counting kit 8)法检测细胞的增殖能力, 利用流式细胞技术检测细胞凋亡, 蛋白质印迹法检测IFITM3的表达.

结果: 在原发性肝癌组织中AGR2、IFITM3呈现高表达; 成功构建AGR2的过表达质粒pcDNA3.1-AGR2, 成功构建稳定高表达AGR2的肝癌HepG2细胞. pcDNA3.1-AGR2转染组HepG2细胞中AGR2 mRNA和蛋白的表达水平明显高于阴性对照组和空白对照组. 与阴性对照组比较, pcDNA3.1-AGR2转染组HepG2细胞的体外增殖能力和克隆形成能力明显升高, IFITM3蛋白的表达水平也随之升高.

结论: 上调AGR2可以增加IFITM3的表达, 促进肝癌细胞的增殖.

Keywords: 肝癌; 细胞增殖; 重组人前梯度同源蛋白2; 干扰素诱导跨膜蛋白3

核心提示: 重组人前梯度同源蛋白2(anterior gradient homolog 2, AGR2)基因在人多个腺体的肿瘤组织中呈过表达, 与肿瘤细胞的生长、存活和转移相关; 在肝癌中AGR2调控干扰素诱导跨膜蛋白3(interferon-induced transmembrane protein 3, IFITM3)的表达促进肝癌细胞的增殖的研究未见报道. 本研究在组织和细胞水平探讨AGR2调控IFITM3的表达对肝癌细胞增殖的影响.