Published online 2015-04-08. doi: 10.11569/wcjd.v23.i10.1585
修回日期: 2015-01-29
接受日期: 2015-02-09
在线出版日期: 2015-04-08
目的: 探讨重组人前梯度同源蛋白2(anterior gradient homolog 2, AGR2)的表达对肝癌细胞增殖能力的影响及其可能的作用机制.
方法: 通过实时荧光定量PCR、Western blot、免疫组织化学检测40例肝癌患者癌组织和对应癌旁组织中AGR2基因、干扰素诱导跨膜蛋白3(interferon-induced transmembrane protein 3, IFITM3)的表达情况, 构建AGR2的过表达质粒pcDNA3.1-AGR2, 并将其转染至肝癌细胞中, 运用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法分别检测AGR2 mRNA和蛋白的表达, CCK-8(cell counting kit 8)法检测细胞的增殖能力, 利用流式细胞技术检测细胞凋亡, 蛋白质印迹法检测IFITM3的表达.
结果: 在原发性肝癌组织中AGR2、IFITM3呈现高表达; 成功构建AGR2的过表达质粒pcDNA3.1-AGR2, 成功构建稳定高表达AGR2的肝癌HepG2细胞. pcDNA3.1-AGR2转染组HepG2细胞中AGR2 mRNA和蛋白的表达水平明显高于阴性对照组和空白对照组. 与阴性对照组比较, pcDNA3.1-AGR2转染组HepG2细胞的体外增殖能力和克隆形成能力明显升高, IFITM3蛋白的表达水平也随之升高.
结论: 上调AGR2可以增加IFITM3的表达, 促进肝癌细胞的增殖.
核心提示: 重组人前梯度同源蛋白2(anterior gradient homolog 2, AGR2)基因在人多个腺体的肿瘤组织中呈过表达, 与肿瘤细胞的生长、存活和转移相关; 在肝癌中AGR2调控干扰素诱导跨膜蛋白3(interferon-induced transmembrane protein 3, IFITM3)的表达促进肝癌细胞的增殖的研究未见报道. 本研究在组织和细胞水平探讨AGR2调控IFITM3的表达对肝癌细胞增殖的影响.