基础研究
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世界华人消化杂志. 2015-04-08; 23(10): 1560-1567
Published online 2015-04-08. doi: 10.11569/wcjd.v23.i10.1560
NADPH氧化酶Nox1和Duox2在小鼠肠炎中的表达和意义
杨茉莉, 李宏谦, 李小珍, 姜雅琳, 陈梦露, 高强
杨茉莉, 李宏谦, 李小珍, 姜雅琳, 陈梦露, 高强, 河南科技大学第一附属医院消化内科 河南省洛阳市 471023
杨茉莉, 在读硕士, 主要从事消化系统疾病的研究.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 81370487.
作者贡献分布: 杨茉莉与高强对此文所作贡献均等; 此课题由高强与杨茉莉设计; 研究过程由杨茉莉、李宏谦、李小珍、姜雅琳及陈梦露操作完成; 研究所用试剂及分析工具由高强提供; 数据分析由杨茉莉完成; 本论文写作由杨茉莉与高强完成.
通讯作者: 高强, 主任医师, 471023, 河南省洛阳市涧西区景华路24号, 河南科技大学第一附属医院消化内科. gaoq@mail.haust.edu.cn
电话: 0379-69823153
收稿日期: 2015-01-12
修回日期: 2015-01-30
接受日期: 2015-02-09
在线出版日期: 2015-04-08
Abstract

目的: 探讨NADPH氧化酶Nox1和Duox2在小鼠肠炎发病中的表达及意义.

方法: 将6-8周龄的C57BL/6小鼠随机分为正常组、1.5%葡聚糖硫酸钠(dextran sulphate sodium, DSS)组和3.0%DSS组, 每组10只, 正常组正常饮水, 1.5%和3.0%DSS组分别自由饮用含有1.5%或者3.0%DSS的饮水, 共6 d建立小鼠急性肠炎模型. 通过疾病活动指数(disease activity index, DAI)评分、结肠长度测定和HE染色等方法评估肠道炎症程度. 利用生化方法检测血清丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量以及结肠组织中氧化型谷胱甘肽/还原型谷胱甘肽(oxidized glutathione/glutathione, GSSG/GSH)比率等氧化应激指标, 以评估机体氧化应激程度. 采用免疫组织化学方法和实时定量PCR技术分别检测小鼠结肠组织中NADPH氧化酶Nox1和Duox2蛋白及mRNA表达情况.

结果: 正常组小鼠无肠炎, 1.5%DSS组、3.0%DSS组小鼠分别呈轻度和重度肠炎. 氧化应激指标(MDA、GSSG/GSH)在1.5%DSS组升高, 而3.0%DSS组进一步升高(均P<0.05). NADPH氧化酶Nox1与Duox2蛋白和mRNA在不同炎症程度时表达不同: Nox1蛋白和mRNA在正常组呈高表达, 在1.5%DSS组表达下调(P<0.05), 在3.0%DSS组进一步下调(P<0.05); Duox2蛋白和mRNA在1.5%DSS组表达较正常组明显上调(P<0.05), 而在3.0%DSS组表达下调至正常水平.

结论: Nox1主要在维持肠道正常生理功能中发挥作用, 而Duox2除了维持正常生理功能外, 可能还积极地参与肠炎发病过程.

Keywords: 炎症性肠病; NADPH氧化酶; 氧化应激; Nox1; Duox2

核心提示: 在本实验中, 应用小鼠肠炎模型的方法发现NADPH氧化酶Nox1和Duox2产生的活性氧并不是机体氧化应激的主要贡献者. Nox1主要是在维持结肠组织正常生理功能中发挥重要作用, 而Duox2除了参与维持正常生理功能外, 可能还通过氧化应激途径在肠道黏膜炎症过程中发挥作用.