基础研究
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世界华人消化杂志. 2015-01-08; 23(1): 8-15
Published online 2015-01-08. doi: 10.11569/wcjd.v23.i1.8
外源性NO诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡的作用机制
范丽丽, 李伟华
范丽丽, 宁夏医科大学检验学院 宁夏回族自治区银川市 750003
李伟华, 甘肃省人民医院中心实验室 甘肃省兰州市 730000
范丽丽, 在读硕士, 主要从事消化系疾病的研究.
基金项目: 甘肃省科技支撑项目, No. 090NKCA098.
作者贡献分布: 范丽丽与李伟华对此文所作贡献均等; 此课题由李伟华与范丽丽设计; 研究过程由范丽丽操作完成; 研究所用新试剂及分析工具由李伟华提供; 数据分析由范丽丽完成; 本论文写作由范丽丽与李伟华完成.
通讯作者: 李伟华, 教授, 高级生物工程师, 730000, 甘肃省兰州市东岗西路204号, 甘肃省人民医院中心实验室. liwhsl@163.com
电话: 0931-8281036
收稿日期: 2014-10-09
修回日期: 2014-11-17
接受日期: 2014-11-19
在线出版日期: 2015-01-08
Abstract

目的: 探讨外源性一氧化氮(nitric oxide, NO)诱导中分化胃癌细胞株(SGC-7901)凋亡的潜在机制.

方法: 采用不同浓度的外源性NO供体硝普钠(sodium nitroprusside, SNP)处理细胞, MTT法检测细胞的存活率; 荧光显微镜检测细胞的凋亡形态及凋亡率. 依据有无活性氧(reactive oxygen species, ROS)抑制剂N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine, NAC)和SNP作用细胞, 实验分4组: 对照组、NAC组、SNP组、NAC+SNP组. 采用荧光化学发光仪检测胞内ROS水平; 流式细胞仪检测细胞的凋亡; Western blot检测铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-superoxide dismutase, Cu/Zn-SOD)蛋白的表达. 所有数据采用SPSS17.0分析.

结果: (1)SNP可诱导胃癌细胞凋亡, 且有浓度及时间依赖性; (2)NAC组和对照组在细胞凋亡率及胞内ROS水平上差异无统计学意义(P>0.05); (3)较对照组, 单独SNP可使细胞凋亡率及胞内ROS水平明显升高(P<0.05); 而经NAC干预后, SNP引起的细胞凋亡率和胞内ROS水平均下降(P<0.05), 但仍高于对照组; (4)SNP可引起细胞Cu/Zn-SOD蛋白表达的降低.

结论: 外源性NO可通过抑制胃癌细胞Cu/Zn-SOD蛋白的表达而上调其ROS水平, 该功能可能参与其诱导的胃癌细胞凋亡途径.

Keywords: 胃癌; 外源一氧化氮; 细胞凋亡; 活性氧

核心提示: 外源性一氧化氮(nitric oxide)供体硝普钠(sodium nitroprusside, SNP)可诱导中分化胃癌细胞的凋亡, 且有浓度及时间依赖性; SNP可通过抑制胃癌细胞内铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-superoxide dismutase)蛋白的表达, 上调细胞内活性氧(reactive oxygen species)的水平, 而后经过级联反应, 启动胃癌细胞凋亡途径.