基础研究
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世界华人消化杂志. 2015-01-08; 23(1): 16-21
Published online 2015-01-08. doi: 10.11569/wcjd.v23.i1.16
GLP-1通过抑制肝L02细胞脂性凋亡的可能机制
王珣, 王明林, 鲁新耀, 张鹏, 于红刚, 胡义奎
王珣, 王明林, 鲁新耀, 张鹏, 武汉市武昌医院消化内科 湖北省武汉市 430063
于红刚, 武汉大学人民医院消化内科 湖北省武汉市 430060
胡义奎, 华中科技大学同济医学院附属普爱医院神经内科 湖北省武汉市 430034
王珣, 主治医师, 在职博士, 主要从事消化系统疾病的发病机制研究.
基金项目: 武汉市卫生局科研基金资助项目, No. WX1321.
作者贡献分布: 此课题由王珣、鲁新耀及张鹏设计; 动物模型制作和基因、蛋白检测分析由王明林与于红刚操作完成; 统计学分析由胡义奎完成; 论文写作由王珣完成.
通讯作者: 胡义奎, 主治医师, 430034, 湖北省武汉市硚口区解放大道50号古田三路, 华中科技大学同济医学院附属普爱医院神经内科. 1274965507@qq.com
电话: 027-68831695
收稿日期: 2014-07-31
修回日期: 2014-10-11
接受日期: 2014-11-12
在线出版日期: 2015-01-08
Abstract

目的: 探讨胰高血糖素样肽-1(glucagon-like peptide-1, GLP-1)对棕榈酸(palmitic acid, PA)诱导的肝L02细胞脂性凋亡的影响及可能机制.

方法: 不同浓度PA(0.125、0.250、0.500 mmol/L)分别干预肝L02细胞; 使用Cell Counting Kit-8(CCK-8)试剂盒检测其在12、24和48 h时的细胞增殖活性; 将肝L02细胞随机分为对照组(NC组)、PA干预组(PA组)、PA+SP 600125组(PASP组)及PA+GLP-1组(PAGLP组), 运用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定法(TUNEL法)检测细胞凋亡; 免疫印迹(Western blot)法检测c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase, JNK)、c-Jun、p-JNK及p-c-Jun蛋白表达.

结果: 和对照组相比较, 经PA处理的肝L02细胞增殖活性降低(P<0.05), 而且呈剂量依懒性; 0.5 mmol/L PA干预24 h后, 肝L02细胞凋亡率增加28.4%±2.6%, Western blot结果显示: JNK、c-Jun磷酸化增多; 加用SP 600125或GLP-1后, 细胞凋亡率分别减少21.7%±2.9%和19.4%±2.7%, 差异具有统计学意义(P<0.05), PAGLP组p-JNK与p-c-Jun蛋白表达有所下降, 差异具有统计学意义(P<0.05).

结论: PA可诱导肝L02细胞脂性凋亡; 此过程可能和JNK通路相关; GLP-1可能是通过抑制JNK信号通路来抑制肝L02细胞的脂性凋亡.

Keywords: 非酒精性脂肪性肝炎; 游离脂肪酸; L02细胞; c-Jun氨基末端激酶; 凋亡

核心提示: 我们发现, 棕榈酸(palmitic acid, PA)诱导L02细胞发生凋亡的过程中出现c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase, JNK)活化, 当应用JNK抑制剂SP 600125抑制JNK通路后, L02凋亡率下降, 用胰高血糖素样肽-1(glucagon-like peptide-1, GLP-1)可明显降低经PA诱导的肝L02细胞凋亡率, 抑制了p-JNK和下游底物p-c-Jun表达水平, 提示GLP-1可拮抗PA诱导的肝L02细胞的脂性凋亡, 其过程可能是通过JNK信号通路实现. 为非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis)防治药物的研制提供一定的实验基础.