基础研究
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世界华人消化杂志. 2014-03-08; 22(7): 907-914
Published online 2014-03-08. doi: 10.11569/wcjd.v22.i7.907
紫花牡荆素诱导肝星状细胞凋亡的作用机制
田君湘
田君湘, 湘潭市第三人民医院消化内科 湖南省湘潭市 411102
田君湘, 主要从事消化病的临床治疗.
作者贡献分布: 本文由田君湘独立完成.
通讯作者: 田君湘, 主治医师, 411102, 湖南省湘潭市岳塘区板马路20号, 湘潭市第三人民医院消化内科. 373623423@qq.com
收稿日期: 2013-12-20
修回日期: 2014-01-22
接受日期: 2014-02-03
在线出版日期: 2014-03-08
Abstract

目的: 探讨紫花牡荆素(casticin)促进肝星状细胞(hepatic stellate cell, HSC)-T6凋亡的作用机制.

方法: 用终浓度为0、0.5、1.0、2.0 μmol/L的Casticin作用于HSC-T6, 于12、24、48 h后采用MTT法检测HSC-T6增殖抑制率; 24 h后收集各组细胞, 流式细胞术检测细胞周期及凋亡率; DNA琼脂糖凝胶电泳法检测HSC-T6凋亡; RT-PCR法检测促凋亡基因FAS/FASL mRNA及抑凋亡基因Bcl-2 mRNA的表达; 免疫组织化学法检测凋亡蛋白Caspase3的表达.

结果: MTT法检测显示, Casticin对HSC-T6有增殖抑制作用, 并存在浓度和时间依赖关系; 流式细胞仪检测HSC-T6凋亡, 发现2.0 μmol/L的Casticin作用48 h后, HSC-T6凋亡率达到最大值55.70%±5.56%, 各药物组凋亡率与空白对照组比较, 差异有统计学意义(P<0.05). DNA琼脂糖凝胶电泳法检测HSC-T6凋亡, 显示有特征性的DNA梯度带形成. RT-PCR法检测促凋亡基因FAS/FASL mRNA表达明显上调, 而抑凋亡基因Bcl-2 mRNA的表达下调. 免疫组织化学法检测凋亡蛋白Caspase3的表达明显增加, 当Casticin浓度2.0 μmol/L作用48 h, 其表达率71.33%±2.68%, 与空白对照组比较, 差异有统计学意义(P<0.05).

结论: Casticin诱导HSC-T6细胞凋亡的机制可能是通过上调Fas/FasL基因表达, 下调Bcl-2, 促使线粒体通透性增加, 再激活Caspase3蛋白诱发细胞凋亡.

Keywords: 紫花牡荆素; 肝星状细胞-T6; 凋亡; Fas/FasL; Bcl-2; Caspase3

核心提示: 紫花牡荆素能过抑制肝星状细胞(hepatic stellate cell, HSC)的活化, 通过上调Fas/FasL基因表达, 下调Bcl-2, 促使线粒体通透性增加, 再激活Caspase3蛋白诱发细胞凋亡. 其抑制HSC活化作用与抑制肝纤维化, 进一步抑制肝癌密切相关.