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蛋白激酶C在糖基化终末产物介导结肠平滑肌细胞内钙离子浓度中的作用
朱滢, 王庆娥, 王云, 巩尧瑶, 孙晓萌, 林琳, 南京医科大学第一附属医院消化科 江苏省南京市 210029
朱滢, 在读硕士, 主要从事胃肠动力性疾病的研究.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 81270462; 江苏省国际合作基金资助项目, No. BZ2011044.
作者贡献分布: 该课题由王云、朱滢及林琳共同设计; 研究过程由朱滢、孙晓萌及巩尧瑶操作完成; 研究所用试剂及分析工具由巩尧瑶与朱滢提供; 数据分析由朱滢与王庆娥完成; 论文撰写由朱滢完成; 林琳与王云协助课题设计并修改论文.
通讯作者: 林琳, 教授, 210029, 江苏省南京市广州路300号, 南京医科大学第一附属医院消化科. lin9100@aliyun.com
电话: 025-68136920
收稿日期: 2013-12-06
修回日期: 2013-12-30
接受日期: 2014-01-08
在线出版日期: 2014-02-28
修回日期: 2013-12-30
接受日期: 2014-01-08
在线出版日期: 2014-02-28
Abstract
目的: 探讨糖基化终末产物(advanced glycation end products, AGEs)对结肠平滑肌细胞内钙离子浓度的影响及可能机制.
方法: 酶解法分离培养SD大鼠结肠平滑肌细胞(smooth muscle cell, SMC), α-actin免疫荧光鉴定; 激光共聚焦显微镜检测(SMC)钙闪烁; 蛋白激酶C(protein kinase C, PKC)活性检测试剂盒检测细胞PKC活性.
结果: 细胞免疫荧光鉴定大鼠结肠SMC. 不同浓度AGEs(50、100 μg/mL)刺激结肠SMC后, 与对照组比较, 钙离子浓度显著降低(56.7%±3.6%、78.6%±5% vs 99.6%±3.1%, P<0.05, P<0.01), 50 μg/mL为体外最大有效浓度. 与对照组相比, AGEs(50、100 μg/mL)升高细胞内PKC活性. PKC抑制剂chelerythrine可阻断AGEs介导的钙离子浓度降低(70.7%±3.7% vs 87.1%±2.5%, P<0.05).
结论: AGEs可激活PKC通路、从而降低胞内钙离子的浓度, 最终抑制大鼠结肠平滑肌收缩.
Keywords: 糖基化终末产物; 结肠平滑肌细胞; 蛋白激酶C; 钙离子
核心提示: 本研究提示糖基化终末产物(advanced glycation end products, AGEs)可激活结肠平滑肌细胞内的蛋白激酶C(protein kinase C, PKC), PKC磷酸化下游底物丝/苏氨酸残基, 调节结肠平滑肌细胞内钙离子浓度, 参与细胞收缩等功能.