基础研究
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世界华人消化杂志. 2014-12-08; 22(34): 5235-5241
Published online 2014-12-08. doi: 10.11569/wcjd.v22.i34.5235
IL-6显著调节亚油酸棕榈酸联合诱导脂肪肝细胞模型中脂代谢的通路表达
史冬梅, 董方元, 张帆, 黄一沁, 胡晓娜, 张赣生, 于晓峰, 保志军
史冬梅, 董方元, 张帆, 黄一沁, 胡晓娜, 张赣生, 于晓峰, 保志军, 复旦大学附属华东医院消化科 上海市 200040
史冬梅, 主治医师, 主要从事肝脏疾病尤其是脂肪肝的临床和基础研究.
基金项目: 上海市卫生局青年科研基金资助项目, No. 2010Y063; 上海市卫生系统优秀学科带头人培养计划基金资助项目, No. XBR2013091.
作者贡献分布: 史冬梅为此课题的设计者及主要完成者; 董方元、张帆及胡晓娜参与实验及论文写作; 黄一沁与张赣生为数据统计分析的完成者; 论文审校由于晓峰与保志军完成.
通讯作者: 保志军, 教授, 主任医师, 200040, 上海市延安西路221号, 复旦大学附属华东医院消化科. xinyi8681@sina.com
电话: 021-62483180
收稿日期: 2014-09-10
修回日期: 2014-10-24
接受日期: 2014-11-05
在线出版日期: 2014-12-08
Abstract

目的: 探讨白介素-6(interleukin-6, IL-6)在亚油酸(sodium oleate)、棕榈酸(sodium palmitate)联合诱导L-02脂肪肝细胞模型中的可能作用机理.

方法: 将亚油酸和棕榈酸作用于人肝细胞株L-02形成脂肪浸润的肝脏细胞模型. 实时定量PCR和ELISA检测细胞内及外分泌IL-1β、IL-6和IL-17α的表达水平, Western blot检测细胞胰岛素受体底物1(insulin receptor substrate 1, IRS-1), Grb2相关结合蛋白2(Grb2-associated binder 2, Gab2), 磷脂酰肌醇3-激酶(phosphoinositide-3-kinase, PI3K), 蛋白激酶B(protein kinase B, AKT)和细胞因子信号抑制因子-3(suppressor of cytokine signaling-3, SOCS3)的信号表达. 蛋白芯片方法检测对照组以及脂肪肝模型组中IL-6下游信号通路蛋白质分子的磷酸化水平.

结果: 在脂肪酸处理的肝脏L-02细胞中, IL-6在细胞内外表达均明显升高, IL-17α在体外肝脏细胞表达无变化, IL-1β在体外肝脏细胞内mRNA水平表达显著升高, 但是在细胞外无分泌(P<0.05). IRS-1、Gab2、a-tubulin、PI3K、AKT和SOCS3在两者细胞中表达差异无统计学意义. 蛋白芯片研究发现IL-6下游Shc/ERK信号通路(Shc, ERK)、mTOR信号通路(p70S6K)及PI3K/AKT信号通路(AKT2)均有激活, 而下游核因子-κB(nuclear factor-κB, NF-κB)信号通路可能受到抑制(IKKβ). 此外, IL-6能够引起磷酸化的GSK3β、PKCζ、eIF4E等分子的磷酸化水平也显著上调.

结论: IL-6在脂代谢中发挥重要的作用. L-02细胞脂肪浸润过程中, IL-6表达量上调并分泌后, 其下游信号通路被广泛激活.

Keywords: 白介素-6; 亚油酸; 棕榈酸; 脂肪肝

核心提示: 初步研究了白介素-6(interleukin-6, IL-6)在亚油酸和棕榈酸联合诱导脂肪肝L-02细胞模型中的作用, 发现IL-6下游Shc/ERK信号通路、mTOR信号通路(p70S6K)及磷脂酰肌醇3-激酶(phosphoinositide-3-kinase)/蛋白激酶B(protein kinase B, AKT)信号通路(AKT2)均有激活, 而下游核因子-κB(nuclear factor-κB)信号通路可能受到抑制(IKKβ). 体外实验还显示IL-1β、IL-17α不参与脂肪肝L-02细胞脂代谢.