γ-氨基丁酸对溃疡性结肠炎大鼠离体结肠平滑肌的影响

Abstract

目的: 以硫酸葡聚糖5000(dextran sulfate sodium, 3%DSS)诱导建立溃疡性结肠炎(uncreative colitis, UC)模型, 研究γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid, GABA)对实验性UC大鼠结肠离体平滑肌的影响.

方法: Wistar大鼠17只随机分为正常组(6只)和模型组(11只). 正常组饮用蒸馏水, 模型组饮用含3%DSS的蒸馏水, 诱导建立大鼠UC模型, 每天观察大鼠体质量和大便性状, 进行疾病活动指数(disease activity index, DAI)评分, 9 d后模型组UC模型建立. 所有大鼠处死后观察大体形态改变, 并自病变严重部位取组织标本, HE染色, 镜下观察结肠的病理学改变. 同时取大鼠结肠平滑肌, 以离体结肠收缩张力变化为指标观察, 观察GABA、GABA_A受体激动剂蝇蕈醇和GABA_A受体拮抗剂荷包牡丹碱、GABA_B受体拮抗剂巴氯酚对大鼠离体结肠平滑肌的影响.

结果: 模型组大鼠第5天出现大便形状改变, 30%为大便松散不成型, 70%出现腹泻, 为黄色稀便, 第7天左右40%左右大鼠出现明显血便, 活动及进食明显减少, 病理学检查正常组大鼠结肠无黏连, 黏膜轻度充血, 无溃疡形成, 镜下组织结构可见, 腺体排列基本整齐; 模型组大鼠腺体数目减少, 组织结构紊乱, 黏膜糜烂, 出血、坏死和大面积深层溃疡. 与正常组相比, 模型组大鼠DAI(3.83±2.74 vs 1.23±1.62, P<0.05), 组织病理学评分(2.52±1.36 vs 0.41±0.74, P<0.05)显著升高; 与加GABA前比较, GABA对正常大鼠和UC大鼠离体结肠平滑肌自主收缩活动均有抑制作用(P<0.05), 0.01 mmol/L GABA和100 mmol/L GABA对正常大鼠离体结肠平滑肌抑制率分别为20.00%±0.02%和67.60%±0.03%, 0.01 mmol/L GABA和100 mmol/L GABA对溃疡性结肠大鼠离体结肠平滑肌抑制率分别为19.50%±0.02%和64.50%±0.05%, 但GABA对正常大鼠和UC大鼠离体结肠平滑肌自主收缩活动抑制作用差异无统计学意义(P>0.05). 与加药前比较, 0.01 mmol/L GABA_A受体拮抗剂荷包牡丹碱能使大鼠离体结肠平滑肌收缩张力增大(1.25 g±0.03 g vs 0.77 g±0.04 g, P<0.05); 与加药前比较, 0.01 mmol/L GABA_A受体激动剂蝇蕈醇能显著抑制大鼠离体结肠平滑肌张力(0.38 g±0.03 g vs 0.75 g±0.06 g, P<0.05); 与加药前比较, 0.01 mmol/L GABA_B受体拮抗剂巴氯酚能显著抑制大鼠离体结肠平滑肌张力(0.45 g±0.05 g vs 0.75 g±0.04 g, P<0.05).

结论: DSS可成功诱导建立大鼠UC模型, GABA对UC大鼠离体结肠平滑肌收缩起抑制作用. 大鼠离体结肠平滑肌中存在GABA_A受体以及GABA_B受体, GABA作用于GABA_A受体起抑制收缩作用, GABA作用于GABA_B受体起收缩增强作用.

Keywords: γ-氨基丁酸; 受体激动剂; 受体拮抗剂; 溃疡结肠炎; 结肠离体平滑肌

核心提示: 硫酸葡聚糖5000能成功诱导大鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, UC)动物模型, γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid, GABA)对UC大鼠离体结肠平滑肌收缩起抑制作用. 大鼠离体结肠平滑肌中存在GABA_A受体以及GABA_B受体, GABA作用于GABA_A受体起抑制收缩作用, GABA作用于GABA_B受体起收缩增强作用.