基础研究
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世界华人消化杂志. 2014-11-08; 22(31): 4719-4725
Published online 2014-11-08. doi: 10.11569/wcjd.v22.i31.4719
HSP90α的表达对食管癌细胞侵袭转移能力的影响
郭雨, 李秀娟, 张琪琪, 张志强
郭雨, 张志强, 新疆医科大学第一附属医院消化科 新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市 830000
李秀娟, 新疆医科大学病理生理教研室 新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市 830000
张琪琪, 新疆医科大学第五附属医院消化科 新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市 830000
郭雨, 在读硕士, 主要从事消化系肿瘤的研究.
基金项目: 新疆乌鲁木齐感染与肿瘤重点实验室开放课题基金资助项目, No. WIT-2013-05.
作者贡献分布: 郭雨负责完成实验部分及论文撰写; 张琪琪负责实验流程设计; 李秀娟负责实验技术指导; 张志强负责实验数据分析.
通讯作者: 张志强, 副教授, 副主任医师, 830000, 新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市鲤鱼山南路137号, 新疆医科大学第一附属医院消化科. doczzq@sina.com
电话: 0991-4362608
收稿日期: 2014-08-10
修回日期: 2014-09-05
接受日期: 2014-09-30
在线出版日期: 2014-11-08
Abstract

目的: 探讨热休克蛋白90α(heat shock protein 90α, HSP90α)在食管癌(esophageal carcinoma, EC)细胞侵袭转移中的作用机制.

方法: 分别采用RT-PCR和Western blot检测HSP90α在具有不同侵袭转移潜能的EC细胞株CE81T-0和CE81T-4中mRNA水平和蛋白质水平的表达差异; 细胞转染技术将siRNA-HSP90α转染入CE81T-4细胞中, 并分为实验组、阴性对照组、空白对照组; 并用RT-PCR和Western blot检测3组细胞中HSP90α mRNA水平和蛋白质水平的表达差异, 验证是否转染成功. MTT法检测3组细胞的增殖活力, 流式细胞术分析细胞周期、凋亡的改变, 划痕实验和Transwell体外侵袭实验检测转染后CE81T-4细胞迁移和侵袭的变化.

结果: CE81T-4细胞中的HSP90α的mRNA和蛋白质表达水平明显高于CE81T-0细胞(P<0.05); siRNA-HSP90α成功转染CE81T-4细胞后, RT-PCR和Western blot检测3组结果显示, 实验组中HSP90α mRNA水平和蛋白水平表达量显著低于空白对照组和阴性对照组(P<0.05); MTT实验结果显示, 实验组细胞的增殖能力明显减弱, 与其他两组比较差异具有统计学意义(P<0.05); HSP90α基因表达沉默后, 细胞凋亡率为32.67%, 较空白对照组和阴性对照组明显增加(P<0.05); 实验组细胞周期被阻滞在G0/G1期; Transwell体外侵袭实验显示实验组侵袭迁移的细胞数显著低于空白照组与阴性对照组(P<0.05); 划痕实验结果显示, 72 h后实验组细胞的迁移力较其他两组明显降低.

结论: HSP90α的下调会降低EC细胞的转移侵袭能力.

Keywords: 食管癌; HSP90α; 侵袭转移

核心提示: 热休克蛋白90α(heat shock protein 90α, HSP90α)的表达与食管癌(esophageal carcinoma, EC)的侵袭转移能力密切相关, 应用RNA干扰技术使HSP90α的表达下调会导致EC细胞的增殖、侵袭和转移受到抑制, 并促进EC细胞凋亡并使其细胞周期阻滞在G0/G1期, 为EC的治疗提供临床参考价值.