基础研究
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世界华人消化杂志. 2014-10-28; 22(30): 4559-4565
Published online 2014-10-28. doi: 10.11569/wcjd.v22.i30.4559
两种亚型肠易激综合征中氨基酸神经递质及其受体变化
唐洪梅, 涂星, 柴玉娜, 张庆业, 黄育生, 张棋
唐洪梅, 涂星, 柴玉娜, 张庆业, 广州中医药大学第一附属医院药学部 广东省广州市 510405
涂星, 柴玉娜, 黄育生, 广州中医药大学第一临床医学院 广东省广州市 510405
张棋, 浙江科技学院生物与化学工程学院 浙江省杭州市 310023
唐洪梅, 教授, 主要从事中药制剂与药理机制的研究.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 81073160; 广东省自然科学基金资助项目, Nos. 1015104701000041, S2012010010539.
作者贡献分布: 唐洪梅参与全部研究过程, 完成课题的设计, 提供实验所需经费; 涂星负责建立微透析采样方法及数据处理与分析; 柴玉娜负责氨基酸递质受体蛋白的分析和测定; 黄育生负责氨基酸神经递质的含量测定; 张棋与张庆业完成两种亚型肠易激综合征动物模型的建立和评价; 唐洪梅与涂星完成论文的撰写; 论文修改由唐洪梅与柴玉娜完成.
通讯作者: 涂星, 510405, 广东省广州市白云区机场路16号, 广州中医药大学第一附属医院药学部, 广州中医药大学第一临床医学院. kuangsheng1234@126.com
电话: 020-36588708
收稿日期: 2014-07-25
修回日期: 2014-09-09
接受日期: 2014-09-15
在线出版日期: 2014-10-28
Abstract

目的: 探讨脑局部微透析-高效液相色谱(high performance liquid chromatography, HPLC)法测定谷氨酸(glutamate, Glu)、甘氨酸(glycine, Gly)、γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid, γ-GABA)、牛磺酸(taurine, Tau)含量的可行性, 便秘主导型肠易激综合征[irritable bowel syndrome (IBS) with constipation, IBS-C]和腹泻主导型肠易激综合征(IBS with diarrhea, IBS-D)大鼠脑组织中氨基酸类神经递质含量及γ-氨基丁酸受体A(γ-aminobutyric acid receptor A, GABAAα1)蛋白的表达情况, 初步探讨IBS-C、IBS-D的共性发病机制.

方法: 以体外相对回收率和体内相对损失率为考察指标, 分析Glu、Gly、Tau和γ-GABA的脑局部微透析采样可行性, 建立荧光高效液相色谱分析方法; 采用冰水灌胃法建立IBS-C动物模型, 番泻叶灌胃结合束缚刺激法建立IBS-D动物模型, 并检测各组大鼠脑内氨基酸类神经递质含量; 采用Western blot法测定各组大鼠脑组织中GABAAα1蛋白的表达情况.

结果: 脑局部微透析-HPLC法可用于脑内Glu、γ-GABA的含量测定, 体外相对回收率分别约为21.6%、24.5%, 体内相对损失率分别约为41.8%、32.5%; 与正常组大鼠相比, IBS-C组和IBS-D组大鼠脑内Glu/γ-GABA比值均显著性升高(P<0.05), GABAAα1蛋白表达显著增加(P<0.05); 与IBS-C组大鼠比较, IBS-D组大鼠脑内GABAAα1受体蛋白表达显著增加(P<0.05).

结论: IBS-C、IBS-D的发病可能与脑内兴奋性氨基酸Glu和抑制性氨基酸GABA含量比值、GABAAα1蛋白表达量有关, 存在共性基础.

Keywords: 腹泻型肠易激综合征; 便秘型肠易激综合征; 脑微透析-高效液相色谱法; 氨基酸类神经递质; γ-氨基丁酸受体

核心提示: 本研究探讨了氨基酸神经递质及其受体在两种亚型肠易激综合征(irritable bowel syndrome, IBS)中的变化, 从腹泻主导型肠易激综合征(IBS with diarrhea, IBS-D)、便秘主导型肠易激综合征(IBS with constipation, IBS-C)模型大鼠脑组织谷氨酸(glutamate)/γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid, γ-GABA)含量和GABAAα1受体蛋白表达均显著升高, 揭示了脑-肠轴参与IBS的共性发病机制; 且GABAAα1受体蛋白表达在IBS-D中升高较IBS-C更明显, 揭示了脑-肠轴参与IBS-C、IBS-D发病机制的差异性.