基础研究
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世界华人消化杂志. 2014-10-18; 22(29): 4386-4392
Published online 2014-10-18. doi: 10.11569/wcjd.v22.i29.4386
乳鼠结肠组织体外培养过程中TGF-β1对上皮细胞极性特征的影响
付道时, 文彬, 张凌杭, 李茹柳
付道时, 文彬, 张凌杭, 李茹柳, 广州中医药大学脾胃研究所 广东省广州市 510405
付道时, 在读硕士, 主要从事肿瘤微环境与结肠癌早期启动分子机制的研究.
作者贡献分布: 此课题由文彬设计; 付道时负责实验操作与完成论文的撰写; 张凌杭负责数据统计; 李茹柳提供实验设备.
通讯作者: 文彬, 研究员, 510405, 广东省广州市机场路12号, 广州中医药大学脾胃研究所. wenbin@gzucm.edu.cn
电话: 020-36585077
收稿日期: 2014-08-01
修回日期: 2014-08-27
接受日期: 2014-09-03
在线出版日期: 2014-10-18
Abstract

目的: 建立乳鼠结肠组织器官培养体系, 分析转化生长因子β1(transforming growth factor-β1, TGF-β1)对组织上皮细胞表面极性特征的影响.

方法: 在乳鼠结肠组织器官培养过程中添加10 ng/mL TGF-β1干预48 h后, 采用免疫组织化学、RT-PCR技术检测培养组(无添加TGF-β1)和干预组结肠组织中Crumbs3、E-cadherin、α-平滑肌肌动蛋白(alpha smooth muscle actin, α-SMA)的表达分布变化.

结果: 贴壁培养48 h后, 可见培养组(无添加TGF-β1)组织块周围有铺路石样细胞爬满培养板, Crumbs3主要表达在上皮细胞顶端膜位置(P<0.01), E-cadherin主要表达在结肠组织黏膜上皮层, α-SMA沿隐窝轴单层表达和少量表达在平滑肌层. 而添加TGF-β1干预后的结肠组织周边细胞形态大小不一, E-cadherin主要表达在细胞质, 并呈低表达(P<0.05), α-SMA则大量表达在活化态的肌成纤维细胞和间充质中(P<0.01). 培养组E-cadherin、Crumbs3的mRNA的表达量在48 h后明显低于干预组(P<0.05), 而干预组中α-SMA的mRNA表达高于培养组(P<0.01).

结论: TGF-β1可诱导乳鼠结肠上皮细胞极性蛋白Crumbs3的表达下降并导致肠上皮细胞表型的改变.

Keywords: 转化生长因子β1; 器官培养; 极性; 细胞表型; 肿瘤微环境

核心提示: 转化生长因子β1(transforming growth factor-β1, TGF-β1)参与调节细胞的增殖、分化、发育和凋亡. 是肿瘤微环境中重要的生长因子. TGF-β1抑制极性蛋白的表达和诱导上皮细胞表型转换, 通过这一潜在的作用机制修饰和改造间充质微环境.