研究快报
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世界华人消化杂志. 2014-07-18; 22(20): 2900-2904
Published online 2014-07-18. doi: 10.11569/wcjd.v22.i20.2900
结肠癌阿霉素不敏感与上皮细胞间质细胞样转化的关系
李金鹏, 刘昊, 于皆平, 于红刚
李金鹏, 刘昊, 于皆平, 于红刚, 武汉大学人民医院消化内科 湖北省武汉市 430060
李金鹏, 博士, 主要从事消化系肿瘤的防治.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 81272693.
作者贡献分布: 实验操作与论文撰写由李金鹏完成; 刘昊参与实验设计与实验指导; 于皆平与于红刚参与论文修改.
通讯作者: 于红刚, 主任医师, 430060, 湖北省武汉市武昌区解放路238号, 武汉大学人民医院消化内科. yuhongang@126.com
电话: 027-88041919 传真: 027-88041919
收稿日期: 2014-03-19
修回日期: 2014-04-02
接受日期: 2014-04-09
在线出版日期: 2014-07-18
Abstract

目的: 探讨结肠癌细胞对阿霉素化疗的不敏感性是否与上皮细胞间质细胞样转化过程有关.

方法: 应用不同浓度阿霉素作用(24 h)于结肠癌HCT116细胞株以选定阿霉素作用浓度. 低剂量(50 nmol/L)阿霉素长时间(7 d)作用于结肠癌HCT116细胞株, 采用MTT[3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐]法检测阿霉素对癌细胞的生存抑制率, Western blot蛋白免疫印迹技术检测多药耐药基因糖蛋白(multidrug resistance gene glycoprotein, MDR p-gp)和上皮细胞间质细胞转化(epithelial mesenchymal transition, EMT)相关的标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)及转录因子Snail和Slug的蛋白表达水平. 同时应用免疫荧光染色技术检测上述转录因子的细胞相对表达和分布.

结果: MTT结果显示阿霉素对结肠癌细胞存活率的影响, 不同浓度的阿霉素处理癌细胞24 h后细胞存活率呈浓度依赖性下降. 50 nmol/L阿霉素作用于癌细胞7 d, 发现第1天到第3天细胞存活率呈逐渐下降趋势, 但从第4天开始存活率逐渐升高. Western blot提示低剂量长时间的阿霉素作用使得MDR p-gp和EMT相关的标志物和转录因子Vimentin、Snail和Slug较对照组显著高表达, 而E-cadherin白较对照组低表达. 免疫荧光结果也提示EMT相关转录因子Snail和Slug的表达阿霉素处理组高于对照组.

结论: 结肠癌对阿霉素的长时间作用效果不敏感, 可能与癌细胞发生上皮细胞间质细胞样转化过程有关.

Keywords: 阿霉素; 结肠癌; 化疗; 耐药性; 上皮细胞间质细胞样转化

核心提示: 低剂量阿霉素在体外实验中能诱导结肠癌细胞产生耐药性并发生上皮细胞间质细胞样转化过程(epithelial to mesenchymal transition, EMT), 逆转临床化疗过程中可能产生的EMT或许会增强化疗的效果.