Published online 2014-07-08. doi: 10.11569/wcjd.v22.i19.2740
修回日期: 2014-04-11
接受日期: 2014-05-29
在线出版日期: 2014-07-08
目的: 观察大鼠在非酒精性脂肪肝(nonalcoholic fatty liver disease, NAFLD)形成过程中肝细胞钙联蛋白(calnexin, CNX)及葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78, GRP78)的表达变化, 旨在探讨CNX及GRP78在非酒精性脂肪肝发生发展中的作用.
方法: ♂SD大鼠20只, 随机分为正常组和NAFLD组, 每组各10只. NAFLD组大鼠采用高脂高糖饮食制备非酒精性脂肪肝动物模型, 正常组大鼠则给予普通饲料喂养, 造模时间为12 wk. 测定各组大鼠血清甘油三酯(triglyceride, TG)、总胆固醇(total cholesterol, TC)、低密度脂蛋白(low-density lipoprotein, LDL)、高密度脂蛋白(high-density lipoprotein, HDL)及游离脂肪酸(free fatty acids, FFA)的含量; 采用实时荧光定量PCR检测肝组织中CNX和GRP78 mRNA的表达变化; 采用Western blot检测肝组织中CNX、GRP78、CCATT/增强子结合蛋白同源蛋白(CCATT/enhancer-binding protein homology protein, CHOP)及磷酸化JNK(p-JNK)蛋白的表达变化; 同时采用TUNEL法检测肝细胞凋亡情况.
结果: 与正常组比较, NAFLD组大鼠血清中TG、TC、LDL、FFA含量明显增高(P<0.05或P<0.01), 而HDL则明显下降(P<0.01); Western blot结果显示NAFLD组大鼠肝组织中CNX、GRP78、CHOP及p-JNK蛋白的表达显著高于正常组大鼠; 实时荧光定量PCR结果显示, 与正常组大鼠比较, NAFLD组大鼠肝脏中CNX及GRP78 mRNA水平明显增高(P<0.05); 同时, TUNEL法检测肝细胞凋亡发现NAFLD组大鼠肝细胞凋亡数目较正常组大鼠显著增加(P<0.01).
结论: 钙联蛋白及GRP78表达上调可能参与了非酒精性脂肪肝的发生发展过程.
核心提示: 内质网应激参与了非酒精性脂肪性肝病的发生发展过程, 其介导肝细胞损伤的机制可能与内质网应激时凋亡信号通路中CHOP和p-JNK的表达增加有关.