ChREBP及其靶基因PNPLA3在大鼠非酒精性脂肪性肝病发病中的作用

Abstract

目的: 研究碳水化合物反应元件结合蛋白转录因子(carbohydrate responsive element binding protein, ChREBP)及其靶基因含patatin样磷脂酶域3(patatin-like phospholipase domain containing family member A3, PNPLA3)在非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease, NAFLD)中的作用以及NAFLD的发病机制.

方法: 将48只200 g±20 g体质量的成年♂SD大鼠, 随机分为对照组24只(普通饲料喂养)和模型组24只(高脂饲料喂养), 分别于第4周末, 第8周末和第12周末处死各组大鼠8只, 并进行血清生化的测定; 在光镜下观察肝组织病理变化; 用免疫组织化学方法检测ChREBP蛋白的表达水平; 用RT-PCR技术检测肝脏ChREBP以及PNPLA3基因的mRNA的表达.

结果: (1)成功构建NAFLD大鼠模型, 光镜下观察可见对照组大鼠肝脏组织结构正常, 各项生化指标均在正常范围, 肝组织内表达少量ChREBP蛋白; (2)模型组大鼠较肥胖, 肝脏明显增大, 肝细胞内可见脂滴沉积, 血清生化天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase, AST)、丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase, ALT)、总胆固醇(total cholesterol, TC)、甘油三酯(triglycerides, TG)水平升高(P<0.05), 空腹血糖(fasting blood glucose, FBG)及空腹血胰岛素(fasting serum insulin, FINS)水平升高(P<0.05), 并随着喂养时间的增加而逐渐增加(P<0.05), 而胰岛素敏感指数(insulin sensitive index, ISI)明显下降(P<0.05); (3)模型组大鼠肝组织ChREBP蛋白和ChREBP、PNPLA3 mRNA的表达水平升高, 与对照组差异具有统计学意义(P<0.05), 且随造模时间的延长其表达量也增加(P<0.05); (4)相关分析显示, 在模型组中, ChREBP mRNA的相对表达量与PNPLA3、血清AST 、ALT水平、肝脏炎症活动度计分呈正相关(r = 0.409, P<0.05; r = 0.498, P<0.05; r = 0.677, P<0.01; r = 0.729, P<0.01; r = 0.566, P<0.01), 与ISI呈负相关(r = -0.611, P<0.01).

结论: 高脂饮食引起ChREBP的表达增强, 其可能激活了脂质合成相关基因PNPLA3的表达, 并可能通过参与胰岛素抵抗的调控促进脂肪肝的形成.

Keywords: 非酒精性脂肪性肝病; ChREBP基因; PNPLA3基因; 胰岛素抵抗

核心提示: 碳水化合物反应元件结合蛋白转录因子(carbohydrate responsive element binding protein)及其靶基因磷脂酶域3(patatin-like phospholipase domain containing family member A3)在非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease, NAFLD)发病中起着非常重要的作用, 可以利用他们与NAFLD的关系, 阻止NAFLD发生发展的过程, 延缓疾病的进展, 以期待对NAFLD的治疗有新的方法.