研究快报
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世界华人消化杂志. 2014-06-28; 22(18): 2572-2577
Published online 2014-06-28. doi: 10.11569/wcjd.v22.i18.2572
黄连素对结肠癌细胞系HT-29增殖和凋亡的影响
李湘楚, 熊建光, 程正位, 程思, 刘启胜
李湘楚, 熊建光, 程正位, 程思, 刘启胜, 咸宁市中心医院消化内科 湖北省咸宁市 437100
李湘楚, 副主任医师, 主要从事消化系肿瘤的研究.
基金项目: 湖北省自然科学基金资助项目, Nos. 2012FFC115, 2011CDC149.
作者贡献分布: 李湘楚负责细胞培养、MTT和流式检测以及文章写作; 熊建光负责Western blot检测; 程正位负责RT-PCR部分检测; 程思负责实验数据分析; 刘启胜负责课题设计.
通讯作者: 刘启胜, 副主任医师, 437100, 湖北省咸宁市金桂路228号, 咸宁市中心医院消化内科. 41040402@qq.com
收稿日期: 2014-04-13
修回日期: 2014-05-04
接受日期: 2014-05-06
在线出版日期: 2014-06-28
Abstract

目的: 探讨黄连素(berberine, BER)对人结肠癌细胞株HT-29的作用及其机制.

方法: 将对数生长期HT-29细胞分成对照组和黄连素组. 对照组细胞常规培养, 黄连素组细胞培养体系中加入黄连素(3 μmol/L). 各组细胞培养72 h后, 利用MTT检测细胞增殖; 流式检测细胞凋亡, RT-PCR检测细胞JAK2、STAT3、Bax和Bcl-2基因表达; Western blot检测细胞中JAK2、STAT3、p-JAK2、p-STAT3、Bax和Bcl-2蛋白的变化, Caspase3活性试剂盒检测Caspase3活性.

结果: 黄连素组与对照组相比, HT-29细胞增殖率明显下降(P<0.05), 凋亡率明显升高(P<0.05), RT-PCR检测显示, 黄连素组与对照组相比Bax mRNA水平增高, Bcl-2 mRNA水平降低, 但JAK2和STAT3 mRNA表达无明显差异. Western blot检测显示, 黄连素组与对照组相比JAK2、STAT总蛋白无明显变化(P>0.05), 但p-JAK2、p-STAT3和Bcl-2表达水平明显降低, Bax增高(P<0.05), Caspase3活性试剂盒检测显示黄连素组与对照组相比Caspase3活性明显增加(P<0.05).

结论: 黄连素通过抑制JAK2/STAT3信号传导通路抑制HT-29细胞增殖和促进HT-29细胞凋亡.

Keywords: 黄连素; HT-29; 增殖; 凋亡; JAK2/ STAT3

核心提示: 本实验以结肠癌细胞系HT-29为靶细胞, 进一步证实了JAK2/STAT3信号通路是结肠癌发生的重要致病机制, 黄连素可通过抑制JAK2/STAT3信号通路激活而促进HT-29细胞凋亡, 抑制HT-29增殖, 从而达到抗肿瘤的效果.