研究快报
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世界华人消化杂志. 2014-06-18; 22(17): 2439-2444
Published online 2014-06-18. doi: 10.11569/wcjd.v22.i17.2439
MicroRNA570通过Wnt/β-catenin通路抑制人结肠癌HT-29细胞的增殖及调控机制
叶玉兰, 周春立, 庞智, 郑家驹
叶玉兰, 周春立, 庞智, 郑家驹, 南京医科大学附属苏州医院消化内科 江苏省苏州市 215008
叶玉兰, 主治医师, 主要从事胃肠肿瘤方面的研究.
基金项目: 苏州市青年基金资助项目, No. KJXW2012024.
作者贡献分布: 叶玉兰与庞智对此文贡献均等; 实验设计由叶玉兰与庞智完成; 数据获取由叶玉兰完成; 数据统计由周春立与庞智完成; 论文撰写由叶玉兰完成; 实验监督由郑家驹完成.
通讯作者: 周春立, 主任医师, 215008, 江苏省苏州市广济路242号, 南京医科大学附属苏州医院消化内科. pangzhi0273@sina.com
电话: 0512-62363008
收稿日期: 2014-02-26
修回日期: 2014-04-06
接受日期: 2014-04-20
在线出版日期: 2014-06-18
Abstract

目的: 探讨microRNA570(miR-570)对人结肠癌细胞株HT-29生物学特性的影响, 并阐明其对Wnt/β-catenin通路的影响机制.

方法: 将miR-570 mimics转染人结肠癌细胞株HT-29后, 采用cell counting(CCK-8)法检测细胞增殖变化, 应用实时定量PCR技术检测转染后HT-29细胞中miR-570的表达, Western blot技术及实时定量PCR技术检测各组中胞核及胞浆内β-catenin的变化, 及对Wnt/β-catenin通路下游基因c-myc、cyclinD1和survivin表达的影响.

结果: HT-29细胞转染miR-570 mimics后, HT-29细胞增殖能力下降, 72 h细胞增殖抑制率最为明显, 约为53.23%±1.22%(P<0.05). 实时定量PCR结果显示miR-570表达上调20倍(20.01±0.32)(P<0.05). Western blot技术及实时定量PCR技术检测显示, β-catenin、c-myc、cyclinD1和survivin蛋白表达和mRNA表达均下降(P<0.05), 而空白对照组与阴性对照差异无统计学意义. Western blot结果进一步证实胞核内β-catenin的蛋白表达量下降明显, 而胞浆内, β-catenin的蛋白表达量无明显变化.

结论: miR-570能明显抑制人结肠癌细胞株HT-29的增殖, 并下调Wnt相关基因的表达, 其可能作为抑癌基因参与Wnt/β-catenin信号通路的调节.

Keywords: MicroRNA570; HT-29; β-catenin; Wnt

核心提示: 结肠癌是危害人类健康的重大疾病之一, 在世界范围内是位居前列的常见肿瘤. Wnt/β-catenin信号通路的激活对结肠癌的发生、发展起重要作用. 而miR-570与Wnt/β-catenin信号通路的相关性文献鲜有报道. 本研究探讨上调miR-570后在结肠癌细胞株中的作用及其作用机制, 分析针对miR-570的靶向治疗对结肠癌的治疗价值.