Published online 2014-05-18. doi: 10.11569/wcjd.v22.i14.2003
修回日期: 2014-04-02
接受日期: 2014-04-09
在线出版日期: 2014-05-18
目的: 探讨在染料木黄酮(genistein, Gen)与氟尿嘧啶(5-fluorouracil, 5-FU)诱导肝癌MHCC97-L细胞凋亡作用中p42/44丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases, MAPKs)对Bax的调控.
方法: 倒置显微镜观察细胞密度和细胞形态; 荧光显微镜(Annexin V-FITC/PI)检测细胞凋亡及细胞死亡; Western blot检测Bax蛋白表达.
结果: 倒置显微镜下, 所有药物组细胞密度均下降, 死亡细胞及碎片散落在培养液中, 贴壁细胞皱缩或变形, 胞浆透明度下降, 可见空泡结构, 其中以PD98059+Gen+5-FU组变化最明显; 荧光显微镜下, 所有药物组均可检测到凋亡和死亡细胞; Western blot检测各组Bax蛋白的相对表达量由高到低依次为Gen+5-FU、Gen、5-FU、PD98059+Gen+5-FU、PD98059+5-FU、PD98059+Gen、PD98059、对照组, PD98059+Gen组的Bax蛋白表达与PD98059组十分接近, 且明显低于Gen组; PD98059+5-FU组和PD98059+Gen+5-FU组的Bax蛋白表达介于单用抑制剂组与未用抑制剂预处理的对应药物组之间.
结论: Gen、5-FU和Gen+5-FU均能诱导MHCC97-L细胞凋亡, 并与上调Bax有关; Gen对Bax的调控与p42/44 MAPK通路关系密切; 5-FU和联用组调控Bax需要有p42/44 MAPK通路参与.
核心提示: 降低p42/44丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases)的活性能拮抗木黄酮(genistein)和氟尿嘧啶(5-fluorouracil)单用及联用对MHCC97-L细胞上调Bax的作用, 但所有经PD98059预处理的药物组抗肝癌细胞增殖的效果并没有减弱, 反而增强, 提示存在其他机制与之相互作用.