Published online 2014-05-18. doi: 10.11569/wcjd.v22.i14.1984
修回日期: 2014-04-03
接受日期: 2014-04-09
在线出版日期: 2014-05-18
目的: 观察紫草素作用前后对人共刺激细胞的增殖及对胃癌细胞NCI-N87、BGC-823、HGC-27杀伤活性的影响, 并探讨其作用机制.
方法: 分离健康者外周血单个核细胞, 在体外经CD3单克隆抗体(CD3 monoclon antibody, CD3 mAb)、白介素2(interleukin-2, IL-2)、干扰素γ(interferon-γ, IFN-γ)、白介素1α(interleukin-1α, IL-1α)、CD28 mAb、IL-15和IL-21共同诱导为人共刺激细胞, 予不同浓度紫草素诱导人共刺激细胞和3株胃癌细胞24、48、72 h后, 水溶性四唑盐(cell counting kit-8, CCK8)法检测人共刺激细胞增殖率, 四甲基偶氮唑蓝(colorimetric methyl thiazolyl tetrazolium, MTT)法检测胃癌细胞的抑制率, 流式细胞术(flow cytometry, FCM)检测人共刺激细胞颗粒酶B(granzyme B, GraB)、穿孔素(perforin, PFP)、CD107a、IFN-g的表达, Western blot检测人共刺激细胞b-catenin、P-ERK1/2、P-AKT和Bcl-2的表达, 乳酸脱氢酶释放法(lactate dehydrogenase, LDH)检测紫草素对人共刺激细胞杀伤3株胃癌细胞的活性影响.
结果: 经紫草素诱导48 h后, 人共刺激细胞0.2-50 mg/L浓度组增殖明显(P<0.05), 6-25 mg/L浓度组GraB、PFP、CD107a、IFN-g和β-catenin、p-ERK1/2、Bcl-2、P-AKT的表达显著高于对照组(P<0.05), 且对NCI-N87、BGC-823、HGC-27的杀伤活性较对照组增强(P<0.05).
结论: 紫草素在一定浓度范围内能够促进人共刺激细胞增殖, 并增强其对胃癌细胞NCI-N87、BGC-823、HGC-27的杀伤活性, 其机制可能与活化β-catenin、P-ERK1/2、Bcl-2、P-AKT和PFP、GraB、CD107a、IFN-g的表达有关.
核心提示: 紫草素在一定浓度范围内能促进人共刺激细胞增殖并提高其杀伤活性, 其可能机制为紫草素能激活β-catenin、磷酸化细胞外信号调节激酶l/2、Bcl-2和P-AKT信号通路促进人共刺激细胞增殖, 提高人共刺激细胞颗粒酶B(granzyme B)、穿孔素(perforin)、CD107a和干扰素γ(interferon-γ)表达促进人共刺激细胞对胃癌细胞的杀伤活性.