基础研究
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世界华人消化杂志. 2014-05-18; 22(14): 1928-1935
Published online 2014-05-18. doi: 10.11569/wcjd.v22.i14.1928
白藜芦醇对酒精诱导的HepG2细胞氧化损伤的保护作用及相关基因表达的变化
何培元, 高淑梅, 侯志平, 马立新, 李炳庆
何培元, 马立新, 李炳庆, 承德医学院附属医院消化内科 河北省承德市 067000
高淑梅, 承德医学院附属医院心电室 河北省承德市 067000
侯志平, 承德医学院病理教研室 河北省承德市 067000
何培元, 主治医师, 主要从事消化系统疾病的研究.
基金项目: 河北省卫生厅基金资助项目, No. 20110179.
作者贡献分布: 本课题设计由何培元、高淑梅、侯志平及李炳庆完成; 研究过程由何培元、 侯志平及高淑梅完成; 数据统计分析由马立新完成; 论文写作由何培元与侯志平完成; 由李炳庆完成论文的修改.
通讯作者: 李炳庆, 教授, 主任医师, 067000, 河北省承德市南营子大街6号, 承德医学院附属医院消化内科. libq@sohu.com
电话: 0314-2279514 传真: 0314-2279514
收稿日期: 2014-02-17
修回日期: 2014-03-22
接受日期: 2014-03-28
在线出版日期: 2014-05-18
Abstract

目的: 探讨白藜芦醇在酒精诱导的HepG2细胞氧化应激中的抗氧化作用, 揭示白藜芦醇抗酒精性肝损伤的作用机制.

方法: 白藜芦醇预处理HepG2细胞24 h后, 用酒精诱导氧化应激的产生. MTT方法检测白藜芦醇处理组与对照组HepG2细胞活力; 用ELISA试剂盒检测不同实验组的超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)和细胞内总活性氧(reactive oxygen species, ROS)含量; 采用RT-PCR方法检测抗氧化通路中关键基因SOD1、SOD2和过氧化氢酶的mRNA表达水平.

结果: MTT结果显示, 与对照组比较, 白藜芦醇(12.5、25、50、100 μmol/L)对HepG2细胞的细胞毒性均在20%以下, 300 mmol/L酒精可致近50%HepG2细胞死亡; 25-100 μmol/L白藜芦醇可有效对抗300 mmol/L酒精对HepG2引起的细胞毒性作用; SOD活性显示100 μmol/L白藜芦醇预处理组SOD含量(0.391±0.011)明显高于非处理组(0.286±0.019), 而ROS结果显示酒精诱导组(29234.79±2288)明显高于白藜芦醇25、50、100 μmol/L预处理组(18023.26±1359.66; 13528.44±1078.99; 8219.87±635.99); RT-PCR结果显示, 与300 mmol/L酒精比较, 25、50和100 μmol/L白藜芦醇可上调SOD1 mRNA表达量(0.5535±0.0035; 0.586±0.0113; 0.623±0.0127); 12.5、25、50、100 μmol/L白藜芦醇均可上调SOD2 mRNA表达量(1.249±0.011; 1.369 ±0.028; 1.377±0.021; 1.401±0.0578); 50和100 μmol/L白藜芦醇均可上调过氧化氢酶(0.1955±0.004; 0.2275±0.00707)mRNA的表达量.

结论: 本研究提示酒精可诱导氧化应激的产生, 而白藜芦醇通过调节抗氧化通路中基因的表达发挥抗氧化功能, 从而削弱酒精的细胞损伤作用.

Keywords: 白藜芦醇; 氧化应激; HepG2; 抗氧化

核心提示: 本研究发现经白藜芦醇处理后, 酒精诱导的细胞内总活性氧(reactive oxygen species)含量明显下降, 氧化应激(oxidative stress)较未处理组减轻. 随后应用Real-time PCR技术对超氧化物歧化酶(superoxide dismutase)和过氧化氢酶mRNA表达水平的检测证明白藜芦醇可以通过增加抗氧化酶的表达提高抗氧化酶活性, 加快活性氧自由基代谢, 从而起到细胞保护作用.