研究快报
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世界华人消化杂志. 2014-05-08; 22(13): 1834-1840
Published online 2014-05-08. doi: 10.11569/wcjd.v22.i13.1834
二十二碳六烯酸对人肝癌细胞HepG2的作用与调控β-catenin及C-myc表达的关系
李衍彦, 范友杰, 邹浩, 姜海涛, 李洁旭, 孙良金, 曹景玉
李衍彦, 邹浩, 姜海涛, 李洁旭, 孙良金, 曹景玉, 青岛大学附属医院(黄岛院区) 山东省青岛市 266003
范友杰, 新乡市中心医院普外科 河南省新乡市 453000
李衍彦, 青岛大学医学院肝胆外科硕士研究生, 主要从事肝脏肿瘤外科治疗方面的研究.
作者贡献分布: 李衍彦与曹景玉对此文献贡献均等. 此课题由李衍彦设计; 曹景玉指导; 研究过程由李衍彦、范友杰及邹浩完成; 研究所用试剂由李衍彦与曹景玉提供; 数据分析由李衍彦、姜海涛、李洁旭及孙良金完成; 本论文写作由李衍彦完成.
通讯作者: 曹景玉, 主任医师, 266003, 青岛市黄岛区五台山路1677号, 青岛大学附属医院(黄岛院区). cjy7027@163.com
收稿日期: 2014-02-14
修回日期: 2014-03-19
接受日期: 2014-03-28
在线出版日期: 2014-05-08
Abstract

目的: 探讨不同浓度的二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid, DHA)对人肝癌细胞HepG2生长增殖抑制及促进凋亡的作用及其机制, 为其应用于肝癌的药物预防和治疗提供实验及理论依据.

方法: 以DHA浓度0 μg/mL为阴性对照, 设置浓度为15、30、45、60、75 μg/mL的实验组. 采用CCK-8和流式细胞术检测不同浓度DHA对HepG2细胞生长的相对抑制率及凋亡情况, 并运用荧光定量PCR及Western blot分别从基因和蛋白质水平分析不同浓度DHA作用前后β-连环蛋白(β-catenin)及C-myc表达量的变化.

结果: CCK-8实验表明DHA在体外能抑制HepG2细胞生长, 在DHA作用浓度为0-45 μg/mL, 作用时间24 h时, 实验组与对照组细胞吸光度(A)值差异有显著的统计学意义(P<0.01), 实验组内两两比较差异有统计学意义(P<0.01), 细胞生长抑制率最高达90.7%. 继续增加药物浓度或作用时间, 差异无统计学意义. 流式细胞术发现DHA可促进HepG2细胞凋亡, 实验组与对照组细胞凋亡率差异有显著的统计学意义(P<0.01), 实验组内两两比较差异有统计学意义(P<0.01). 荧光定量PCR显示DHA可下调HepG2细胞中C-myc基因表达水平, 实验组与对照组C-myc基因相对表达量的差异有显著的统计学意义(P<0.01), 实验组内两两比较差异有统计学意义(P<0.01); 实验组与对照组及各实验者组之间β-catenin基因的相对表达量差异无统计学意义. Western blot显示DHA可降低HepG2细胞β-catenin、C-myc蛋白质的表达量.

结论: DHA对人肝癌HepG2细胞有明显的生长增殖抑制及促进凋亡的作用, 与其降低β-catenin蛋白质水平进而下调C-myc基因表达水平有关.

Keywords: 二十二碳六烯酸; 肝癌; Wnt/β-catenin信号通路

核心提示: 二十二碳六烯酸对体外培养的人肝癌HepG2细胞有明显的生长增殖抑制及促进凋亡的作用, 与其降低β-catenin蛋白质水平进而下调C-myc基因表达水平有关.