研究快报
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世界华人消化杂志. 2014-05-08; 22(13): 1826-1833
Published online 2014-05-08. doi: 10.11569/wcjd.v22.i13.1826
Th17及Th1细胞在四氯化碳致肝纤维化小鼠模型中的表达及关系
黄小丽, 郭晓云, 姜海行, 覃山羽, 罗薇, 马诗家, 卢东红, 陈梅, 王家旭, 杨显文
黄小丽, 郭晓云, 姜海行, 覃山羽, 罗薇, 马诗家, 卢东红, 陈梅, 王家旭, 杨显文, 广西医科大学第一附属医院消化内科 广西壮族自治区南宁市 530021
黄小丽, 在读硕士, 主要从事肝纤维化机制的研究.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, Nos. 81260083, 31360221.
作者贡献分布: 此课题由郭晓云、姜海行、覃山羽、罗薇及黄小丽设计; 研究过程由黄小丽、马诗家、卢东红、陈梅、王家旭及杨显文操作完成; 研究所用试剂及分析工具由姜海行提供; 数据分析由黄小丽完成; 本论文写作由黄小丽完成.
通讯作者: 郭晓云, 副主任医师, 530021, 广西壮族自治区南宁市双拥路6号, 广西医科大学第一附属医院消化内科. withoutgloom@sohu.com
电话: 0771-5356725
收稿日期: 2014-02-20
修回日期: 2014-03-21
接受日期: 2014-03-28
在线出版日期: 2014-05-08
Abstract

目的: 研究辅助性T细胞17(T helper cells 17, Th17)和Ⅰ型辅助性T细胞(typeⅠhelper T cells, Th1)及其相关因子白介素-17(interleukin-17, IL-17)、干扰素-γ(interferon-γ, IFN-γ)在四氯化碳(carbon tetrachloride, CCl4)诱导肝纤维化小鼠模型中的表达及相互关系.

方法: 将50只♂Balb/c小鼠按随机数字表法分为5组: 正常对照组(n)、4 wk对照组(C4)、8 wk对照组(C8)、4 wk肝纤维化组(F4)、8 wk肝纤维化组(F8), 每组10只. 采用腹腔内注射CCl4以复制肝纤维化小鼠模型. HE和Masson染色观察小鼠肝脏病理改变; 免疫组织化学染色检测肝脏组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SMA)的表达; 流式细胞检测小鼠脾脏中CD4+IL-17+ T(Th17)细胞、CD4+IFN-γ+ T(Th1)细胞的比例; 酶联免疫吸附试验(ELISA)测定外周血IL-17、IFN-γ的含量, 并分析这些指标的相关性.

结果: (1) 肝组织病理切片HE染色和Masson染色显示, CCl4腹腔注射成功诱导小鼠肝纤维化模型; (2)α-SMA免疫组织化学显示: 模型组α-SMA表达增加, 在门静脉、汇管区及纤维间隔区域内可见α-SMA大量表达, 且随肝纤维化程度加重而增加; (3)F4组和F8组小鼠脾脏Th17细胞、Th1细胞比例明显高于N组、C4组和C8组, 且以F8组增高更为明显, 差异均有统计学意义(均P<0.05); (4)F4组和F8组外周血IL-17、IFN-γ的含量较N组、C4组和C8组明显增高, 差异均有统计学意义(均P<0.05); (5)模型组脾脏Th17细胞、Th1细胞与肝脏α-SMA含量密切正相关(均P<0.01), 脾脏Th17细胞分别与Th1细胞、外周血IL-17水平密切正相关(均P<0.01).

结论: CCl4致肝纤维化小鼠模型中脾脏Th17和Th1细胞及外周血IL-17、IFN-γ水平明显升高, Th17细胞通过分泌IL-17参与肝纤维化过程.

Keywords: Th17细胞; Th1细胞; 肝纤维化; 白介素-17; 干扰素-γ

核心提示: 辅助性T细胞17(T helper cells 17)与Ⅰ型辅助性T细胞(typeⅠhelper T cells)细胞的免疫调节作用可能在肝纤维化的发病机制中发挥关键的作用; 同时与其相关的细胞因子也参与了疾病的免疫过程.