研究快报
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世界华人消化杂志. 2014-04-08; 22(10): 1409-1416
Published online 2014-04-08. doi: 10.11569/wcjd.v22.i10.1409
苦参素逆转人肝癌细胞株HepG2/ADM多药耐药的作用
王炜, 黄赞松, 周喜汉, 覃月秋
王炜, 桂林医学院 广西壮族自治区桂林市 541000
黄赞松, 周喜汉, 覃月秋, 右江民族医学院消化疾病研究所 右江民族医学院附属医院消化内科 广西壮族自治区百色市 533000
王炜, 在读硕士, 主要从事中药抗消化系肿瘤多药耐药的研究.
基金项目: 广西自然科学基金资助项目, No. 桂科自0542119; 广西医疗卫生重点科研基金资助项目, No. 桂卫重200887; 广西中医药管理局基金资助项目, No. 桂卫中gzzc0955.
作者贡献分布: 此课题由王炜与黄赞松设计; 研究过程由王炜、周喜汉及覃月秋操作完成; 数据分析由王炜与覃月秋完成; 本论文写作由王炜完成; 黄赞松负责本课题的理论指导.
通讯作者: 黄赞松, 教授, 主任医师, 533000, 广西壮族自治区百色市城乡路98号, 右江民族医学院消化疾病研究所, 右江民族医学院附属医院消化内科. huangzansong@hotmail.com
电话: 0776-2825103
收稿日期: 2013-12-12
修回日期: 2014-01-28
接受日期: 2014-02-18
在线出版日期: 2014-04-08
Abstract

目的: 探讨苦参素(oxymatrine, OM)体外逆转人肝癌耐药细胞株多药耐药的作用及其机制.

方法: MTT法检测耐药细胞株HepG2/阿霉素(adriamycin, ADM)多药耐药性及苦参素干预前后耐药细胞药敏性的变化; 流式细胞术检测苦参素对耐药细胞细胞凋亡及细胞膜表面P糖蛋白(P-glycoprotein, P-gp)表达的影响; 实时荧光定量PCR法检测苦参素作用前后耐药细胞内三磷酸腺苷结合运转蛋白B1(ATP-binding cassette, sub-family B member 1, ABCB1)基因的表达的变化.

结果: 当苦参素浓度为0.5 mg/mL时对HepG2及HepG2/ADM 2种细胞株的生长抑制率均<10%, 无明显毒性作用. HepG2/ADM细胞株对ADM、顺铂(cisplatin, CDDP)、5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil, 5-FU)3种化疗药物表现出不同程度的耐药性, 其耐药指数分别为27.52、5.50、4.39. 无细胞毒性的0.5 mg/mL浓度的苦参素能够部分逆转HepG2/ADM对上述3种化疗药物的耐药性, 其逆转倍数分别为3.68、2.82、2.03倍. 苦参素作用HepG2/ADM细胞24、48、72 h后, 各组细胞早期细胞凋亡率较各阴性对照组均有所提高且随OM作用时间的延长而逐渐增加(1.77%±0.25% vs 0.50%±0.10%, 2.53%±0.15% vs 0.63%±0.06%, 3.83%±0.42% vs 0.66%±0.06%, P<0.05). 苦参素作用48 h后与阴性对照组比较HepG2/ADM耐药细胞株ABCB1基因表达下调, 其比率为0.49倍; 耐药细胞株细胞膜表面P-gp的表达下调(21.50%±1.08% vs 40.83%±0.35%, P<0.01).

结论: 苦参素能够在体外逆转人肝癌耐药细胞株HepG2/ADM的多药耐药性, 其作用机制可能与其提高耐药细胞早期细胞凋亡率, 下调耐药相关基因ABCB1及其蛋白表达产物P-gp的表达有关.

Keywords: 苦参素; 多药耐药; 肝癌; 逆转

核心提示: 苦参素能够在体外部分逆转人肝癌耐药细胞株HepG2/阿霉素(adriamycin)的多药耐药, 相关分子机制可能与其抑制三磷酸腺苷结合运转蛋白B1(ATP-binding cassette, sub-family B member 1)基因的表达, 降低了细胞膜表面P糖蛋白(P-glycoprotein, P-gp)的表达含量, 导致P-gp的转运功能下降, 减少肿瘤细胞对化疗药物的外排和促进肝癌耐药细胞的早期凋亡相关.