基础研究
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世界华人消化杂志. 2014-01-08; 22(1): 17-23
Published online 2014-01-08. doi: 10.11569/wcjd.v22.i1.17
过表达FAF1对胃癌细胞HGC-27增殖及凋亡的影响
袁燕玲, 刘爱群, 冯洁, 陈佳玮, 葛莲英
袁燕玲, 刘爱群, 冯洁, 陈佳玮, 葛莲英, 广西医科大学附属肿瘤医院内镜室 广西壮族自治区南宁市 530021
袁燕玲, 2011级广西医科大学肿瘤学在读硕士, 主要从事消化系肿瘤的基础和临床研究.作者贡献分布: 此课题由葛莲英与刘爱群设计; 实验由袁燕玲、冯洁及陈佳玮共同完成; 论文写作由袁燕玲与刘爱群完成.
基金项目: 广西自然科学基金资助项目, No. 2012GXNSFDA053021; 广西医疗卫生重点科研课题基金资助项目, No. 重2012092.
通讯作者: 葛莲英, 教授, 主任医师, 530021, 广西壮族自治区南宁市河堤路71号, 广西医科大学附属肿瘤医院内镜室. gelianying@hotmail.com
电话: 0771-5310521
收稿日期: 2013-09-26
修回日期: 2013-11-05
接受日期: 2013-11-19
在线出版日期: 2014-01-08
Abstract

目的: 检测过表达Fas相关蛋白1(Fas-associated factor 1, FAF1)对胃癌细胞HGC-27增殖及凋亡的影响, 探讨FAF1与胃癌发生发展的相关性.

方法: 实验分为阴性对照组(未转染组)、空载转染组(感染空载体慢病毒颗粒1.0×108 TU/mL)、过表达FAF1组(感染FAF1过表达慢病毒颗粒1.0×108 TU/mL). 激光共聚焦显微镜观察转染效率, Western blot检测FAF1蛋白的表达情况, 透射电镜观察细胞超微结构变化, 流式细胞仪检测细胞周期分布及凋亡情况, MTT检测细胞生长情况.

结果: 依据GFP绿色荧光可测定细胞转染效率达95%以上; 与阴性对照组和空载转染组相比, 过表达FAF1组FAF1蛋白明显高表达; 阴性对照组和空载转染组均细胞膜完整, 细胞核正常, 两者超微结构无明显差异, 而过表达FAF1组胞核裂解成碎片状, 可见凋亡小体形成; FAF1过表达能够抑制人胃癌细胞HGC-27的增殖, 诱导细胞凋亡, 改变细胞周期的分布, 与阴性对照组和空载转染组相比, 过表达FAF1组细胞的倍增时间显著延长, 细胞凋亡率显著提高(84.66%±5.92% vs 4.60%±3.80%和7.32%±3.82%, P<0.05), G0/G1期细胞显著降低(46.43%±2.43% vs 54.93%±3.5%和54%±0.3%, P<0.05), G2/M期细胞显著增多(29.78%±3.91% vs 19.33%±3.82%和20.93%±2.46%, P<0.05), 差异均有统计学意义.

结论: 构建的过表达FAF1慢病毒可以抑制胃癌细胞的生长, 改变细胞周期的分布, 促进胃癌细胞的凋亡.

Keywords: 胃癌细胞; Fas相关蛋白1; 增殖; 凋亡

核心提示: Fas相关蛋白1(Fas-associated factor 1, FAF1)是新近发现的凋亡相关蛋白, 在胃癌中特异性低表达. 本课题组前期从组织学研究表明FAF1与胃癌的分化及生存预后具有重要的关系, 但在细胞水平的作用尚不清楚, 我们用慢病毒介导FAF1基因过表达转染人胃癌细胞HGC-27后, 发现其能够改变胃癌细胞的周期分布, 明显的促进细胞的凋亡及抑制细胞的增殖.