Published online 2013-12-18. doi: 10.11569/wcjd.v21.i35.4037
修回日期: 2013-07-25
接受日期: 2013-11-19
在线出版日期: 2013-12-18
目的: 在前期实验中, 我们通过体外构建干扰人源性ETS变异基因1(human ETS variant gene 1, hETV1)基因shRNA的载体, 干扰ETV1表达, 进而影响胃肠间质瘤细胞的侵袭作用, 在此, 我们继续通过上述方法, 观察胃肠间质瘤细胞增殖与凋亡的影响.
方法: 体外构建干扰hETV1基因shRNA的慢病毒载体, 感染GIST-T1细胞. 实验分成3组: 空白组、阴性对照组[PLVX(逆转录病毒)-shRNA组]、实验组(PLVX-shRNA-ETV1组),用Western blot方法对合成的靶点进行筛选, 采用体外增殖培养试验(MTT法)和流式细胞凋亡检测感染前后细胞增殖与凋亡的情况.
结果: 在MTT实验的前期阶段, 实验组细胞增殖数量未见明显下降, 与空白组(P = 0.539、P = 0.188)及阴性对照组(P = 0.877、P = 0.992), 无显著性差异, 而在后期阶段, 实验组细胞增殖数量明显受到抑制, 与空白组(P = 0.014、P = 0.000、P = 0.020)及阴性对照组(P = 0.011、P = 0.000、P = 0.003), 有显著性差异; 同时在细胞凋亡试验中, 实验组其凋亡率比空白组(P = 0.000)及阴性对照组(P = 0.000)明显增高, 有显著性差异.
结论: 通过体外干扰ETV1转录因子, 导致GIST-T1细胞在实验后期阶段有明显抑制作用, 细胞凋亡明显增加, 从而影响胃肠间质瘤细胞的进展.
核心提示:ETS变异基因1(ETS variant gene 1, ETV1)转录因子的表达, 在一定程度上可以促进胃肠间质瘤细胞的增殖, 同时抑制了胃肠间质瘤细胞的凋亡进程. 通过对ETV1转录因子研究证明, ETV1转录因子可能成为新的胃肠间质瘤(gastrointestinal stromal tumors)治疗靶点.