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世界华人消化杂志. 2013-12-18; 21(35): 3994-3998
Published online 2013-12-18. doi: 10.11569/wcjd.v21.i35.3994
Published online 2013-12-18. doi: 10.11569/wcjd.v21.i35.3994
高渗透压法制备细菌外膜扫描电镜样品
牛小羽, 张玫, 首都医科大学附属宣武医院消化科 北京市 100053
牛畅, 首都师范大学生命科学学院 北京市 100037
牛畅, 冯尔玲, 刘先凯, 朱力, 军事医学科学院生物工程研究所病原微生物生物安全国家重点实验室 北京市 100071
牛小羽, 主治医生, 主要从事消化系统疾病的研究.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 81171531; 国家"973"基金资助项目, No. 2011CB504901.
作者贡献分布: 本文研究过程与数据分析由牛小羽、牛畅及冯尔玲完成; 课题设计由刘先凯完成; 朱力与张玫负责审校.
通讯作者: 张玫, 主任医师, 100053, 北京市宣武区长椿街45号, 北京市首都医科大学附属宣武医院消化科. zhang2955@sina.com
电话: 010-83198348
收稿日期: 2013-08-12
修回日期: 2013-10-04
接受日期: 2013-11-11
在线出版日期: 2013-12-18
修回日期: 2013-10-04
接受日期: 2013-11-11
在线出版日期: 2013-12-18
Abstract
目的: 近年来, 电子显微技术在生物学领域得到了广泛的应用. 本文利用生物电镜技术对福氏志贺氏菌外膜结构进行了研究, 并对比不同制样方法对电镜照片的影响.
方法: 将各志贺氏菌分别在30 ℃和37 ℃的环境中培养, PCR检测毒力大质粒是否在传代中丢失. 培养至稳定期后, 收集菌液, 分别用非高渗和高渗固定液固定, 制备切片, 使用电子显微镜观察细菌外膜结构.
结果: 在高渗透压环境下制样能使细胞质发生皱缩, 有利于对细胞表面超微结构的观察. 通过电镜图片对比, 发现在37 ℃时, 三株福氏志贺氏菌外膜脂多糖丰度均少于30 ℃.
结论: 高渗透压方法比普通制样方法更有利于对细菌表面超微结构进行观察. 通过对电镜照片的观察, 可以认为福氏志贺氏菌在不同培养温度下脂多糖的相对密度有所差异.
Keywords: 生物电镜; 福氏志贺氏菌; 脂多糖
核心提示: 在高渗透压环境下制样能使细胞质发生皱缩, 比普通制样方法更有利于对细菌表面超微结构进行观察. 通过电镜图片对比, 发现在37 ℃时, 三株福氏志贺氏菌外膜脂多糖丰度均少于30 ℃. 可以认为福氏志贺氏菌在不同培养温度下脂多糖的相对密度有所差异.