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世界华人消化杂志. 2013-12-08; 21(34): 3806-3812
Published online 2013-12-08. doi: 10.11569/wcjd.v21.i34.3806
Published online 2013-12-08. doi: 10.11569/wcjd.v21.i34.3806
大肠高分化腺癌与大肠腺瘤的质谱成像
何滔, 何轩, 郑淑芳, 中国人民武装警察部队后勤学院附属医院病理科 天津市 300162
郭赟, 中国人民武装警察部队后勤学院附属医院内分泌血液科 天津市 300162
胡骁, 天津市职业与环境危害生物标志物重点实验室 天津市 300162
于婷婷, 布鲁克·道尔顿公司 北京市 100081
何滔, 主治医师, 主要从事消化系肿瘤的研究.
基金项目: 天津市应用基础及前沿技术研究计划面上基金资助项目, No. 11JCYBJC13000; 武警后勤学院面上基金资助项目, No. WYMZ201009; 武警后勤学院青年基金资助项目, No. WYQ201101.
作者贡献分布: 此课题由何滔与郑淑芳设计; 研究过程由何滔、何轩及郭赟完成; 研究所用试剂、设备及分析工具由胡晓与于婷婷提供; 数据分析由何滔与于婷婷完成; 本论文写作由何滔、郑淑芳及郭赟完成.
通讯作者: 郑淑芳, 教授, 主任医师, 300162, 天津市东丽区成林路220号, 中国人民武装警察部队后勤学院附属医院病理科. zhengshf@126.com
电话: 022-60578721
收稿日期: 2013-08-28
修回日期: 2013-10-28
接受日期: 2013-11-06
在线出版日期: 2013-12-08
修回日期: 2013-10-28
接受日期: 2013-11-06
在线出版日期: 2013-12-08
Abstract
目的: 采用质谱成像技术比较大肠高分化腺癌组织与腺瘤组织的蛋白质组表达差异, 寻找大肠腺癌相关的蛋白质分子标志物.
方法: 应用质谱成像技术对人体大肠腺癌组织和大肠腺瘤组织冰冻切片进行质谱扫描, 得到蛋白质、多肽的原位分布信息, 初步建立了以质谱成像技术寻找大肠高分化腺癌与腺瘤中差异蛋白的方法. 质谱成像切片制备: 常规10 μm冰冻切片, 用含0.1%三氟乙酸的50%乙腈水溶液配制成15 g/L的α-腈基-4-羟基肉桂酸(α-cyano-4-hydroxycinnamic-acid, CHCA)基质均匀喷洒. 质谱分析条件: 线性正离子模式, 激光能量范围30%-50%, 照射100次, 采样点距200 μm. 获取到的质谱图采用遗传算法计算峰面积. 用峰面积来确定两组之间的差异分子. 采用t检验比较两组间峰差异的显著性.
结果: 与大肠腺瘤比较, 大肠高分化腺癌有显著差异蛋白分子共16个, 其中上调7个, 下调9个.
结论: 质谱成像技术用于大肠高分化腺癌与大肠腺瘤蛋白质组对照研究能够直观反映出大肠高分化腺癌与大肠腺瘤间的蛋白质分子差异, 这些差异分子可能与大肠腺癌的发生、发展相关.
Keywords: 质谱成像; 大肠腺癌; 腺瘤; 蛋白质组学
核心提示: 本文采用质谱成像技术对人组织切片进行研究, 探索样品制备方法、质谱检测技术条件, 初步建立了以质谱成像技术比较研究大肠高分化腺癌与大肠腺瘤差异蛋白的方法. 在实验中,与大肠腺瘤比较, 大肠高分化腺癌有显著差异蛋白多肽分子共16个, 其中上调7个, 下调9个. 从大肠腺瘤演变、发展到高分化腺癌 癌这一阶段蛋白质组发生了改变, 出现了差异蛋白标志物. 而这些标志物, 可能与大肠腺癌的发生、发展相关, 可能具有重要的生物学意义.