研究快报
Copyright ©The Author(s) 2013. Published by Baishideng Publishing Group Inc. All rights reserved.
世界华人消化杂志. 2013-11-28; 21(33): 3695-3699
Published online 2013-11-28. doi: 10.11569/wcjd.v21.i33.3695
二十二碳六烯酸逆转食管癌Eca109/DDP细胞对顺铂耐药的机制
张徐宁, 戴翠萍, 夏前正, 韩雪花, 季宁东
张徐宁, 戴翠萍, 夏前正, 季宁东, 淮阴卫生高等职业技术学校 淮安市消化道肿瘤重点实验室 江苏省淮安市 223300
韩雪花, 淮安市第二人民医院 江苏省淮安市 223001
张徐宁, 副教授, 主要从事肿瘤方面的研究.
基金项目: 江苏省淮安市科技局科技支撑基金资助项目, No. HAS2009002-1; 江苏省卫生厅医学科技发展基金资助项目, No. J200912.
作者贡献分布: 张徐宁与季宁东负责课题设计; 戴翠萍、夏前正及韩雪花负责耐药细胞株构建、MTT以及Western blot检测; 数据分析、论文撰写由张徐宁与戴翠萍完成.
通讯作者: 张徐宁, 副教授, 223300, 江苏淮安市黄河西路2号, 淮阴卫生高等职业技术学校, 淮安市消化道肿瘤重点实验室. hyzxn@aliyun.com
电话: 0517-84920540
收稿日期: 2013-09-02
修回日期: 2013-10-20
接受日期: 2013-11-11
在线出版日期: 2013-11-28
Abstract

目的: 构建食管癌耐药细胞株, 探讨二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid, DHA)逆转人食管癌Eca109/顺铂(cisplatin, DDP)细胞对DDP的耐药作用及其机制.

方法: 采用递增顺铂药物质量浓度持续作用诱导法建立耐顺铂细胞株; MTT法检测DHA对Eca109/DDP细胞增殖影响, 计算耐药逆转作用, Western blot检测Eca109/DDP细胞膜P-糖蛋白(P-glycoprotein, P-gp)表达水平.

结果: 历经6 mo的诱导, Eca109细胞能在含1 μg/mL DDP的培养基中稳定生长, 耐药指数(resistant index, RI)为15.9; DHA浓度在1.560 μg/mL以下, 对Eca109/DDP细胞的生长无显著抑制作用(P>0.05), 但与DDP联合应用能增加DDP对Eca109/DDP细胞的毒性且呈浓度依赖性(P<0.05); 1 μg/mL DDP对Eca109/DDP细胞的半数抑制浓度(IC50)为3.50 μg/mL±1.04 μg/mL, 当分别与0.195、0.390、0.780、1.560 μg/mL的DHA联合应用时, 对Eca109/DDP细胞的半数抑制浓度(IC50)从1.99 μg/mL±0.11 μg/mL降低到0.83 μg/mL±0.22 μg/mL(P<0.05), 提高逆转指数, 并能显著抑制Eca109/DDP细胞P-gp表达水平, P-gp相对表达量从0.99±0.12降至0.52±0.08(P<0.05).

结论: DHA与DDP联合应用通过下调Eca109/DDP细胞P-gp的表达水平逆转对DDP的耐药, 促进DDP对耐药细胞的杀伤作用.

Keywords: 二十二碳六烯酸; 多药耐药; Eca109/DDP; 顺铂; P-糖蛋白

核心提示: 二十二碳六烯酸随着浓度逐渐增高则表现出对Eca109/顺铂(cisplatin, DDP)细胞的增殖抑制作用, 且呈浓度依赖性. 而对肿瘤细胞无杀伤作用的二十二碳六烯酸与1 μg/mL顺铂联用, 可以逆转Eca109/DDP细胞的耐药性, 且呈浓度依赖性, 同时能显著下调P-糖蛋白(P-glycoprotein, P-gp)蛋白表达水平. 初步探讨了二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid)通过下调Eca109/DDP细胞膜上P-gp的过度表达逆转肿瘤细胞的多药耐药机制.