基础研究
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世界华人消化杂志. 2013-08-18; 21(23): 2250-2257
Published online 2013-08-18. doi: 10.11569/wcjd.v21.i23.2250
PI3K/Akt信号通路抑制剂对人肝癌HepG2细胞的体外抑制作用及其机制
张萌, 彭利, 乔治斌, 何宏涛, 周烨, 徐卓
张萌, 彭利, 乔治斌, 何宏涛, 周烨, 徐卓, 河北医科大学第四医院肝胆外科 河北省石家庄市 050011
张萌, 博士, 副主任医师, 主要从事肝胆肿瘤的基础与临床研究.
基金项目: 河北省普通高校强势特色学科建设基金资助项目, No. 2005(52); 河北省卫生厅基金资助项目, No. 06142.
作者贡献分布: 本课题设计与审阅由彭利完成; 文章写作与修改由张萌与何宏涛完成; 统计分析由张萌与徐卓完成; 主要实验与资料整理由周烨与乔治斌完成.
通讯作者: 彭利, 教授, 主任医师, 050011, 河北省石家庄市健康路12号, 河北医科大学第四医院肝胆外科. pengli72@sina.com
电话: 0311-86095340
收稿日期: 2013-06-14
修回日期: 2013-07-08
接受日期: 2013-07-18
在线出版日期: 2013-08-18
Abstract

目的: 研究磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol-3-kinase/protein kinase B, PI3K/Akt)信号通路抑制剂渥曼青霉素对人肝癌HepG2细胞增殖、细胞周期与凋亡的影响以及相关基因pAkt、Skp2及P27kip1表达的变化.

方法: 将不同浓度的渥曼青霉素(0、10、50、100、200 nmol/L)分别作用于对数生长期的人肝癌HepG2细胞3、10、24 h, MTT法测定细胞增殖抑制率, 流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞周期的变化, Western blot检测pAkt、Skp2及P27kip1蛋白表达变化, RT-PCR检测Skp2及P27kip1 mRNA表达变化.

结果: 渥曼青霉素可明显抑制HepG2细胞的增殖, 在一定范围内具有时间和浓度依赖性. 渥曼青霉素可导致G0/G1期HepG2细胞比例明显升高, S期细胞比例明显降低(P<0.05). 随着渥曼青霉素浓度的增加及作用时间的延长, HepG2细胞凋亡率逐渐升高(8.46%±1.17%至28.03%±2.67%)(P<0.05). Western blot结果显示渥曼青霉素可下调pAkt和Skp2蛋白的表达, 上调P27kip1蛋白表达(P<0.05). RT-PCR结果显示渥曼青霉素可明显下调Skp2 mRNA的表达, 而P27kip1 mRNA表达无明显变化.

结论: PI3K/Akt信号通路抑制剂渥曼青霉素可抑制人肝癌HepG2细胞的增殖, 引发G0/G1期阻滞并诱导其凋亡, 其机制可能与PI3K/Akt信号通路参与Skp2及P27kip1调控有关.

Keywords: 磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B; 渥曼青霉素; 肝细胞癌; 凋亡; pAkt; S期激酶相关蛋白2; P27kip1

核心提示: 阻断磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激B(phosphatidylinositol-3-kinase/protein kinase B, PI3K/Akt)信号通路可抑制人肝癌HepG2细胞的增殖, 引发细胞周期阻滞并诱导凋亡, 其机制可能与PI3K/Akt信号通路参与Skp2及P27kip1的调控有关. 这一研究结果为以PI3K/Akt信号通路为靶点的肝细胞癌临床辅助治疗提供了一定的实验基础及理论依据.