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世界华人消化杂志. 2013-08-08; 21(22): 2143-2150
Published online 2013-08-08. doi: 10.11569/wcjd.v21.i22.2143
Published online 2013-08-08. doi: 10.11569/wcjd.v21.i22.2143
miR-30d反义核苷酸对结肠癌细胞增殖及凋亡的影响
张善忠, 周毅, 刘芩, 汪志飞, 万冰, 景德镇市第一人民医院胃肠外科 江西省景德镇市 333000
张善忠, 主治医师, 主要从事结肠癌的临床及基础研究.
作者贡献分布: 此课题由张善忠设计; 研究过程由周毅、刘芩、汪志飞及万冰操作完成; 研究所需标本由刘芩收集; 荧光定量PCR和Western blot由周毅完成; 流式细胞术由汪志飞完成; 细胞生长与克隆形成实验由万冰完成; 数据分析由张善忠完成; 本论文写作由张善忠完成.
通讯作者: 张善忠, 主治医师, 333000, 江西省景德镇市中华北路317号, 景德镇市第一人民医院胃肠外科. luolaibin6677@163.com
收稿日期: 2013-05-07
修回日期: 2013-05-31
接受日期: 2013-07-03
在线出版日期: 2013-08-08
修回日期: 2013-05-31
接受日期: 2013-07-03
在线出版日期: 2013-08-08
Abstract
目的: 研究miR-30d在结直肠癌组织中的表达情况, 并分析miR-30d反义寡核酸(antisense oligonucleotide, ASO)对结肠癌细胞增殖和凋亡的影响.
方法: 运用荧光定量PCR定量检测102例结直肠癌组织及对应癌旁组织中miR-30d的表达; 通过miR-30d ASO降低结肠癌细胞中miR-30d的表达, 利用MTT、细胞克隆形成实验、流式细胞技术观察miR-30d ASO对结肠癌细胞产生的生物学效应.
结果: 在102例结直肠癌病例中, 52.94%(54/102)的结直肠癌组织miR-30d表达明显高于对癌旁组织(P<0.05); miR-30d ASO可以显著降低miR-30d的表达(P<0.05); MTT实验结果显示结肠癌细胞转染miR-30d ASO后, 24、48和96 h的细胞存活数量均明显低于空白对照组和转染无义干扰组(P<0.05); 克隆形成实验结果显示miR-30d ASO组克隆形成率比空白对照组和转染无义干扰组显著降低(P<0.05); 流式细胞仪检测结果显示转染miR-30d ASO组较两个对照组细胞凋亡指数明显增加(P<0.05); 另外, 降低miR-30d的表达后发现Bcl-2 mRNA和蛋白均明显下降(P<0.05).
结论: miR-30d在结肠癌组织中表达上调, 降低miR-30d的表达可有效抑制结肠癌细胞生长、促进细胞凋亡. miR-30d有可能成为结肠癌基因表达调控的新靶点.
Keywords: miR-30d; 反义单核苷酸; 结肠癌; 细胞增殖; 细胞凋亡
核心提示: miR-30d在结肠癌组织中表达上调, 降低miR-30d的表达可有效抑制结肠癌细胞生长、促进细胞凋亡. miR-30d有可能成为结肠癌基因表达调控的新靶点.