Published online 2013-08-08. doi: 10.11569/wcjd.v21.i22.2136
修回日期: 2013-06-02
接受日期: 2013-07-03
在线出版日期: 2013-08-08
目的: 探讨PTD-NBD多肽对体外大鼠胰腺腺泡细胞核因子-κB(nuclear factor κB, NF-κB) p65的表达影响.
方法: 分离培养大鼠胰腺腺泡细胞, 分为正常对照组、急性胰腺炎(acute pancreatitis, AP)组和PTD-NBD多肽组, 用脂多糖(10 mg/L)诱导体外细胞AP模型, 分别于建模6和12 h观察细胞形态学变化, 培养液中淀粉酶(amylase, AMY)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)和白介素(interleukin, IL)-1β含量, RT-PCR和免疫印迹法检测细胞中NF-κB p65 RNA及其蛋白表达.
结果: 与对照组相比, AP组各时间点腺泡细胞发生肿胀和死亡增多(细胞形态学评分: 6 h: 8.90±0.34 vs 1.10±0.13; 12 h: 9.40±0.26 vs 1.20±0.15, P<0.05), 培养液中AMY升高(6 h: 2135.8±347.2 vs 873.5±91.6; 12 h: 3299.6±217.7 vs 917.7±101.9, P<0.05), IL-1β含量升高(6 h: 84.9±15.7 vs 39.3±7.9; 12 h: 95.6±17.1 vs 38.9±5.2, P<0.05), SOD含量降低(6 h: 116.3±30.3 vs 176.2±21.6; 12 h: 101.5±25.6 vs 173.6±27.9, P<0.05), 细胞中NF-κB p65 RNA及其蛋白表达量增多(P<0.05); 与AP组比较, 经PAT-NBD多肽预处理后腺泡细胞出现肿胀和死亡减少(细胞形态学评分: 6 h: 6.80±0.23 vs 8.90±0.34; 12 h: 7.50±0.19 vs 9.40±0.26, P<0.05), 培养液中SOD上升(6 h: 137.6±27.4 vs 116.3±30.3; 12 h: 144.3±23.6 vs 101.5±25.6, P<0.05), AMY下降(6 h: 1951.5±211.7 vs 2135.8±347.2; 12 h: 1761.3±231.5 vs 3299.6±217.7, P<0.05), IL-1β含量明显下降(6 h: 66.8±11.6 vs 84.9±15.7; 12 h: 54.8±21.2 vs 95.6±17.1, P<0.05), NF-κB p65蛋白表达降低(P<0.05).
结论: PTD-NBD多肽透过大鼠胰腺腺泡细胞膜抑制脂多糖刺激的NF-κB p65活化及其活性, 下调IL-1β表达, 上调SOD含量, 从而减轻胰腺腺泡细胞的炎症损伤.
核心提示: 核因子-κB(nuclear factor-κB, NF-κB)参与胰腺腺泡细胞炎症损伤是急性胰腺炎(acute pancreatitis)的早期事件, PTD-NBD多肽可有效透过大鼠胰腺腺泡细胞膜, 并与细胞中NF-κB活化通路上游IκB激酶抑制物(inhibition of IκB kinase)复合物中NBD区域结合, 减少下游炎症介质的生成和释放, 减轻胰腺腺泡细胞炎症损伤.