研究快报
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世界华人消化杂志. 2013-06-18; 21(17): 1636-1641
Published online 2013-06-18. doi: 10.11569/wcjd.v21.i17.1636
慢病毒介导的E2F-1沉默对人胃癌细胞MGC803中药人参黄芪复方药物敏感性的影响
罗文, 吴锟, 王晓通, 谢玉波, 肖强
罗文, 吴锟, 王晓通, 肖强, 广西医科大学第一附属医院胃肠腺体外科 广西壮族自治区南宁市 530021
谢玉波, 广西医科大学第一附属医院麻醉科 广西壮族自治区南宁市 530021
罗文, 主要从事胃癌、甲状腺及乳腺癌的基础与临床研究.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 30860273.
作者贡献分布: 此课题由肖强与谢玉波设计; 实验由罗文、吴锟及王晓通共同完成; 论文写作由罗文与吴锟完成.
通讯作者: 肖强, 教授, 主任医师, 530021, 广西壮族自治区南宁市双拥路22号, 广西医科大学第一附属医院胃肠腺体外科. xiaoqiang20050@yahoo.com.cn
收稿日期: 2013-04-15
修回日期: 2013-05-14
接受日期: 2013-05-19
在线出版日期: 2013-06-18
Abstract

目的: 利用重组慢病毒介导的E2F-1基因沉默载体感染人胃癌MGC-803细胞, 观察其对中药人参黄芪复方药物敏感性的影响.

方法: 将胃癌MGC-803细胞接种于培养板中分为4组: 正常组(正常培养基)、空白对照组(中药培养基)、阴性对照LV-RNAi组(中药培养基+感染空载体慢病毒颗粒2.0×109 TU/mL)、E2F-1-RNAi-LV组(中药培养基+感染E2F-1基因重组慢病毒颗粒2.0×109 TU/mL), 分别采用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测E2F-1 mRNA及蛋白表达; MTT方法检测细胞的增殖抑制率; Giemsa染色检测细胞的克隆形成; 流式细胞仪检测细胞的凋亡; 细胞划痕实验检测细胞迁移能力.

结果: E2F-1基因沉默蛋白及mRNA表达水平均明显下降, 差异有统计学意义(0.384±0.036 vs 0.883±0.051和0.923±0.049, 0.220±0.056 vs 0.729±0.021和0.712±0.037, P<0.05). 中药人参黄芪复方能抑制人胃癌MGC-803细胞生长、诱导胃癌细胞凋亡、抑制细胞克隆形成及迁移; 与空白对照组及阴性对照组相比较, E2F-1基因沉默组MGC-803细胞增殖抑制率、细胞凋亡率显著提高, 其细胞克隆形成、细胞迁移面积显著降低, 差异均有统计学意义(0.789±0.013 vs 0.484±0.060和0.454±0.006, 0.383±0.027 vs 0.114±0.038和0.089±0.051, 0.024±0.003 vs 0.036±0.004和0.052±0.002, 0.553±0.038 vs 0.897±0.020和0.928±0.051, P<0.05).

结论: 重组慢病毒载体介导的E2F-1基因沉默能有效增强中药人参黄芪复方对人胃癌MGC-803细胞的药物敏感性.

Keywords: 中药人参黄芪复方; E2F-1; 人胃癌MGC803细胞; 药物敏感性

核心提示: 慢病毒介导E2F-1基因沉默转染人胃癌MGC803细胞, 可提高胃癌细胞对中药人参黄芪复方的敏感性, 这极有可能通过E2F-1基因沉默增加Caspase 3、PTEN的表达, 抑制细胞内药物外排介质P-糖蛋白(P-glycoprotein)及细胞内药物外排转运蛋白MRP1的表达, 间接使药物泵出细胞外减少, 使细胞内的药物有效浓度提高, 从而提高人胃癌细胞对中药人参黄芪复方敏感性.