橙皮苷预处理对APAP诱导小鼠急性肝损伤的保护作用及凋亡相关基因的影响

Abstract

目的: 探讨橙皮苷(hesperidin, HDN)预处理对扑热息痛(acetaminophen, APAP)导小鼠急性肝损伤的保护作用及凋亡相关基因的影响.

方法: ♂Balb/c小鼠60只, 随机均分为正常组、模型组、联苯双酯组、HDN高、中、低剂量组. 分别给予相应干预10 d后腹腔注射APAP造模, 16 h后处死小鼠, 测定肝、脾指数, 血清谷丙转氨酶(alanine aminotransferase, ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase, AST)及肝匀浆超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-PX)、丙二醛(malondialdehyde, MDA)水平, 光镜观察肝组织病理学变化和TUNEL法检测肝脏细胞凋亡情况, RT-PCR法测肝组织Bcl-2 mRNA、Bax mRNA转录水平.

结果: 与正常组比较, 模型组小鼠肝指数、ALT、AST、MDA均显著升高, SOD、GSH-PX均明显降低(5.41%±0.68% vs 4.38%±0.17%, 1456.49 U/L±413.45 U/L vs 45.36 U/L±11.98 U/L, 1929.34 U/L±810.19 U/L vs 78.49 U/L±10.22 U/L, 32.04 nmol/mgprot±9.32 nmol/mgprot vs 11.83 nmol/mgprot±1.72 nmol/mgprot, 119.29 U/mgprot±33.02 U/mgprot vs 327.22 U/mgprot±26.66 U/mgprot, 75.89 μmol/L±20.21 μmol/L vs 122.73 μmol/L±6.70 μmol/L, 均P<0.01). 与模型组相比, 联苯双酯组和HDN高、中剂量组小鼠肝指数、ALT、AST、MDA均显著降低, SOD、GSH-PX均明显升高(4.65%±0.61%, 4.59%±0.57%, 4.73%±0.63% vs 4.38%±0.17%; 66.36 U/L±13.43 U/L, 225.29 U/L±53.02 U/L, 773.06 U/L±251.27 U/L vs 1456.49 U/L±413.45 U/L; 105.75 U/L±17.02 U/L, 540.92 U/L±170.57 U/L, 906.78 U/L±226.38 U/L vs 1929.34 U/L±810.19 U/L; 15.74 nmol/mgprot±2.98 nmol/mgprot, 16.04 nmol/mgprot±4.92 nmol/mgprot, 20.85 nmol/mgprot±6.04 nmol/mgprot vs 32.04 nmol/mgprot±9.32 nmol/mgprot; 222.52 U/mgprot±56.11 U/mgprot, 245.95 U/mgprot±41.90 U/mgprot, 198.12 U/mgprot±68.09 U/mgprot vs 119.29 U/mgprot±33.02 U/mgprot; 108.70 μmol/L±25.96 μmol/L, 107.39 μmol/L±32.60 μmol/L, 98.90 μmol/L±10.71 μmol/L vs 75.89 μmol/L±20.21 μmol/L, P<0.01或0.05). 各实验组脾指数无明显变化, 差异不具有统计学意义(P>0.05). 肝脏病理学切片显示模型组肝组织明显围绕中央静脉的大片坏死, 并伴有细胞肿胀变性和大量炎性细胞浸润, 细胞凋亡程度明显加重; 联苯双酯组和HDN各剂量组肝组织片状坏死明显减轻, 炎性细胞浸润程度明显减轻, 凋亡程度减轻, 以联苯双酯和HDN高剂量组效果最为显著, 接近正常肝组织. RT-PCR结果显示, APAP可以上调Bax mRNA转录水平, 下调Bcl-2 mRNA转录水平, Bcl-2/Bax比值降低(0.68±0.03 vs 0.28±0.02, 0.21±0.04 vs 0.58±0.01, P<0.01); 联苯双酯和HDN高、中剂量组Bcl-2 mRNA转录水平均显著升高, Bax mRNA转录水平明显降低, Bcl-2/Bax比值升高(0.22±0.04, 0.56±0.01, 0.75±0.01 vs 0.21±0.04; 0.67±0.06, 0.26±0.005, 0.28±0.02 vs 0.68±0.03, P<0.05).

结论: HDN预处理对APAP诱导小鼠急性肝损伤具有保护作用, 其机制可能与其抑制肝细胞脂质过氧化反应及调控凋亡相关基因的表达有关.

Keywords: 橙皮苷; 扑热息痛; 肝损伤; 氧化应激; 凋亡相关基因

核心提示: 橙皮苷(hesperidin)预处理对扑热息痛(acetaminophen)诱导小鼠急性肝损伤具有保护作用, 其机制可能与其抑制肝细胞脂质过氧化反应及调控凋亡相关基因的表达有关.