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miRNA干扰Rap1对肝癌细胞凋亡的影响
甘平, 查勇, 姚乾, 陈真, 谭晶, 昆明医科大学第三附属医院(云南省肿瘤医院)腹部外科 云南省昆明市 650118
甘平, 主任医师, 主要从事腹部肿瘤外科的基础与临床研究.
基金项目: 云南省自然科学应用基础研究基金资助项目, No. 2011FB064.
作者贡献分布: 此课题由查勇选题设计; 研究过程由甘平、查勇及姚乾完成; 谭晶指导实验并对文章审阅.
通讯作者: 谭晶, 主任医师, 650118, 云南省昆明市昆州路519号, 昆明医科大学第三附属医院(云南省肿瘤医院)腹部外科. ynzlfwk@sina. com
电话: 0871-8185656-2315
收稿日期: 2012-12-25
修回日期: 2013-01-11
接受日期: 2013-02-20
在线出版日期: 2013-04-08
修回日期: 2013-01-11
接受日期: 2013-02-20
在线出版日期: 2013-04-08
Abstract
目的: 探讨抑制/激活蛋白(repressor/activator protein, Rap1)对肝癌细胞凋亡的影响及其作用机制.
方法: 肝癌细胞HepG2实验分组为: Rap1 miRNA转染组、空质粒组、对照组(空白对照组). 用流式细胞仪检测各组肝癌细胞凋亡率. 采用Western blot检测各组细胞中Rap1的表达,用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)检测核因子κB(nuclear factor-κB, NF-κB)p65的表达.
结果: 流式细胞仪检测结果提示, 转染后72 h, Rap1 miRNA组肝癌细胞凋亡率, 比空质粒组和对照组高(33.0%±5.8% vs 8.2%±2.5%, 0.6%±0.2%, P<0.05). Rap1 miRNA转染组中Rap1, NF-κB p65表达下降.
结论: miRNA干扰Rap1能促进肝癌细胞凋亡. 同时伴有NF-κB p65表达下降.
Keywords: 肝细胞肝癌; 抑制/激活蛋白; 凋亡
核心提示: 原发性肝细胞癌是危害人类健康的重大疾病之一, 在世界范围内是位居第6位的常见肿瘤. 原发性肝癌的发生发展与凋亡障碍存在密切的联系. 现有研究表明, 端粒结合蛋白和一些肿瘤细胞的凋亡障碍有关. 抑制/激活蛋白(repressor/activator protein, Rap1)是端粒遮蔽蛋白的成分之一. 然而, Rap1在原发性肝癌发生、发展中的作用, 文献中鲜有报道. 本研究探讨Rap1在原发性肝癌细胞凋亡调节中的作用及其作用机制, 分析针对Rap1的靶向治疗对原发性肝癌的治疗价值.