基础研究
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世界华人消化杂志. 2012-02-18; 20(5): 368-373
Published online 2012-02-18. doi: 10.11569/wcjd.v20.i5.368
塞来昔布对胃癌MGC-803细胞RECK、MMP-2、MMP-9基因表达的影响
钟鹰, 李国庆, 黄靓, 毛振江, 王恩湘, 钟茹, 粟滔
钟鹰, 王恩湘, 钟茹, 粟滔, 南华大学附属湘潭医院消化内科 湖南省湘潭市 411100
李国庆, 黄靓, 毛振江, 南华大学附属第二医院消化内科 湖南省衡阳市 421001
钟鹰, 硕士, 主治医师, 主要从事消化系统疾病的研究.
作者贡献分布: 钟鹰与李国庆对此文所作贡献均等; 此课题由钟鹰设计; 李国庆指导; 研究过程由钟鹰、黄靓及毛振江操作完成; 研究所用新试剂及分析工具由钟鹰提供; 数据分析由钟鹰、王恩湘、钟茹及粟滔完成; 本论文写作由钟鹰、王恩湘、钟茹及粟滔完成, 李国庆指导.
通讯作者: 李国庆, 教授, 主任医师, 421001, 湖南省衡阳市, 南华大学附属第二医院消化内科. ligq1970@yahoo.com.cn
电话: 0734-8288962
收稿日期: 2011-08-25
修回日期: 2011-10-18
接受日期: 2011-11-04
在线出版日期: 2012-02-18
Abstract

目的: 研究非甾体类抗炎药(NSAID)塞来昔布对胃癌细胞MGC-803的抑制作用和对RECK、MMP-2、MMP-9基因表达的影响, 以探讨塞来昔布的抗肿瘤机制.

方法: 培养胃癌MGC-803细胞, 实验用不同浓度的塞来昔布(25、50、100 μg/L)分别处理MGC-803细胞不同时间(12、24 h、48 h), 无血清培养基饥饿24 h达同步化后, MTT(噻唑蓝比色法)观察MGC-803细胞增殖; RT-PCR法检测细胞周期调控因子MMP-9、MMP-2、RECK mRNA的表达; Western blot法检测MMP-9、MMP-2、RECK mRNA蛋白的表达.

结果: MTT法显示塞来昔布能抑制胃癌MGC-803细胞增殖, 作用12 h时, 随着塞来昔布处理浓度的增高, 其抑制作用不明显, 组间比较差异不显著(P>0.05), 在作用24、48 h时呈浓度依赖性(25-100 μg/L), 在25、50、100 μg/L作用浓度呈时间依赖性(24-48 h). 塞来昔布在100 μg/L浓度作用细胞48 h时抑制. RT-PCR法检测结果显示, 在12 h的作用时间点, 随着塞来昔布处理浓度的增高, RECK基因及MMP-2、MMP-9 mRNA变化不是很明显, 组间比较无显著差异(P>0.05), 在12 h后, 塞来昔布能增加胃癌细胞RECK mRNA和蛋白表达, 作用呈浓度(25-100 μg/L)和时间依赖性(24-48 h), MMP-2、MMP-9表达则下降. Western blot法检测结果显示, 作用12 h时, 随着塞来昔布处理浓度的增高, 其RECK蛋白及MMP-2, MMP-9蛋白改变不明显, 组间比较差异不显著(P>0.05), 在12 h以后, 塞来昔布能增加RECK mRNA和蛋白表达并减少MMP-2、MMP-9表达, 且作用呈浓度依赖性和时间依赖.

结论: 塞来昔布可抑制人胃癌MGC-803细胞增殖与转移; 其可能是通过上调RECK基因, 进而下调MMP-2、MMP-9来抑制胃癌细胞MGC-803的增殖与转移.

Keywords: 塞来昔布; 胃癌; 细胞增殖; 基质金属蛋白酶; RECK基因