修回日期: 2011-10-18
接受日期: 2011-11-04
在线出版日期: 2012-02-18
目的: 研究非甾体类抗炎药(NSAID)塞来昔布对胃癌细胞MGC-803的抑制作用和对RECK、MMP-2、MMP-9基因表达的影响, 以探讨塞来昔布的抗肿瘤机制.
方法: 培养胃癌MGC-803细胞, 实验用不同浓度的塞来昔布(25、50、100 μg/L)分别处理MGC-803细胞不同时间(12、24 h、48 h), 无血清培养基饥饿24 h达同步化后, MTT(噻唑蓝比色法)观察MGC-803细胞增殖; RT-PCR法检测细胞周期调控因子MMP-9、MMP-2、RECK mRNA的表达; Western blot法检测MMP-9、MMP-2、RECK mRNA蛋白的表达.
结果: MTT法显示塞来昔布能抑制胃癌MGC-803细胞增殖, 作用12 h时, 随着塞来昔布处理浓度的增高, 其抑制作用不明显, 组间比较差异不显著(P>0.05), 在作用24、48 h时呈浓度依赖性(25-100 μg/L), 在25、50、100 μg/L作用浓度呈时间依赖性(24-48 h). 塞来昔布在100 μg/L浓度作用细胞48 h时抑制. RT-PCR法检测结果显示, 在12 h的作用时间点, 随着塞来昔布处理浓度的增高, RECK基因及MMP-2、MMP-9 mRNA变化不是很明显, 组间比较无显著差异(P>0.05), 在12 h后, 塞来昔布能增加胃癌细胞RECK mRNA和蛋白表达, 作用呈浓度(25-100 μg/L)和时间依赖性(24-48 h), MMP-2、MMP-9表达则下降. Western blot法检测结果显示, 作用12 h时, 随着塞来昔布处理浓度的增高, 其RECK蛋白及MMP-2, MMP-9蛋白改变不明显, 组间比较差异不显著(P>0.05), 在12 h以后, 塞来昔布能增加RECK mRNA和蛋白表达并减少MMP-2、MMP-9表达, 且作用呈浓度依赖性和时间依赖.
结论: 塞来昔布可抑制人胃癌MGC-803细胞增殖与转移; 其可能是通过上调RECK基因, 进而下调MMP-2、MMP-9来抑制胃癌细胞MGC-803的增殖与转移.