基础研究
Copyright ©The Author(s) 2012. Published by Baishideng Publishing Group Inc. All rights reserved.
世界华人消化杂志. 2012-02-08; 20(4): 276-281
Published online 2012-02-08. doi: 10.11569/wcjd.v20.i4.276
SphK1对结肠癌lovo细胞的增殖、迁移和凋亡的影响
苏颖洁, 黄杰安, 刘诗权, 钟月圆, 覃蒙斌
苏颖洁, 黄杰安, 刘诗权, 钟月圆, 覃蒙斌, 广西医科大学第一附属医院消化内科 广西壮族自治区南宁市 530021
苏颖洁, 在读硕士, 主要从事结肠癌发病机制的研究.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 30760275; 广西卫生厅基金资助项目, No. Z2008107, 桂卫重2010016.
作者贡献分布: 此课题由刘诗权与黄杰安设计; 研究过程由苏颖洁、钟月圆及覃蒙斌操作完成; 研究所用新试剂及分析工具由黄杰安提供; 数据分析由刘诗权与苏颖洁完成; 本论文由苏颖洁与刘诗权完成.
通讯作者: 刘诗权, 副教授, 530021, 广西壮族自治区南宁市双拥路6号, 广西医科大学第一附属医院消化内科. poempower@163.com
收稿日期: 2011-08-27
修回日期: 2012-01-10
接受日期: 2012-02-06
在线出版日期: 2012-02-08
Abstract

目的: 探讨鞘胺醇激酶1(SphK1)对结肠癌lovo细胞增殖、迁移和凋亡的影响及其作用机制.

方法: 培养人结肠癌lovo细胞株, 实验分3组: 对照组、PMA组和DMS组. PMA组加入佛波醇-12-豆蔻酸酯-13-乙酸酯(PMA, 100 nmol/L), DMS组加入N, N-二甲基鞘胺醇(DMS, 50 µmol/L), 对照组加入等量的培养基. 采用MTT法和克隆形成实验检测细胞生长增殖的变化, 流式细胞术检测细胞凋亡, Tranwell小室模型观察细胞迁移能力的变化, RT-PCR检测mRNA的表达, Western blot检测蛋白的表达.

结果: PMA显著促进细胞的增殖、迁移并抑制细胞的凋亡, DMS则显著抑制细胞的增殖、迁移并促进细胞的凋亡(对照组、PMA组和DMS组的细胞增殖活力: 0.71±0.03 vs 1.05±0.05 vs 0.46±0.04; 克隆形成率: 1.32%±0.26% vs 2.17%±0.17% vs 0.73%±0.13%; 凋亡率: 16.25% vs 9.15% vs 32.58%; 迁移细胞数: 72.19±3.36 vs 98.46±6.25 vs 40.48±4.27; 均P<0.05). PMA显著促进黏着斑激酶(FAK)的活性和表达, 相反DMS则抑制FAK的活性和表达[对照组、PMA组和DMS组FAK mRNA的表达强度: 0.151±0.008 vs 0.212±0.014 vs 0.114±0.021; 蛋白: 0.332±0.022 vs 0.374±0.029 vs 0.296±0.018; 磷酸化FAK(p-FAK Tyr 397)蛋白: 0.186±0.032 vs 0.234±0.017 vs 0.112±0.023; 均P<0.05].

结论: SphK1可促进lovo细胞的增殖和迁移能力并抑制细胞的凋亡, 其机制可能是通过激活FAK通路而发挥作用.

Keywords: 鞘氨醇激酶1; 黏着斑激酶; 增殖; 凋亡; 迁移