Published online 2012-12-28. doi: 10.11569/wcjd.v20.i36.3656
修回日期: 2012-11-15
接受日期: 2012-12-17
在线出版日期: 2012-12-28
目的: 研究细胞信号分子糖原合成酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β, GSK-3β)在D-氨基半乳糖/脂多糖联合注射诱导小鼠重型肝炎肝衰竭中的作用.
方法: 以C57BL/6小鼠为研究对象, 腹腔注射D-氨基半乳糖/脂多糖建立小鼠重型肝炎肝衰竭模型. 动物实验分组: 对照组, 重型肝炎肝衰竭模型组, SB216763干预组(建模前2 h腹腔注射), SB216763治疗组(建模后2 h腹腔注射). Western blot检测肝脏组织GSK-3β磷酸化水平, 检测血清转氨酶(alanine aminotransferase, ALT)、天门冬酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase, AST)评价肝脏功能, 观察肝脏组织病理变化评价肝脏损伤情况, 实时荧光定量PCR法检测肝脏细胞炎症因子基因表达, 并检测凋亡相关蛋白Caspase 3的活性表达. 多组样本均数的两两比较采用One-way ANOVA分析(方差齐者用LSD-t检验, 方差不齐者用Games-Howell法), P<0.05有统计学意义.
结果: Western blot结果显示, GSK-3β在急性肝衰竭过程中磷酸化水平先降低(活性升高)后再次升高; 抑制GSK-3β活性, 无论是干预还是治疗都改善肝脏功能(血清ALT、AST水平明显下降, 肝组织病理损伤明显改善), 并且抑制炎症反应[抑制促炎因子肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)、白介素6(Interleukin-6, IL-6)、IL-1β表达, 促进抗炎因子IL-10高表达], 并可降低凋亡相关蛋白Caspase 3表达.
结论: 在D-氨基半乳糖/脂多糖诱导小鼠急性肝衰竭过程中GSK-3β被激活, 抑制GSK-3β活性通过降低炎症反应和肝细胞凋亡从而改善肝损伤. 因此, 对信号分子GSK-3β活性进行干预有可能为重型肝炎肝衰竭的治疗提供一个新的靶点.