研究快报
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世界华人消化杂志. 2012-12-08; 20(34): 3366-3369
Published online 2012-12-08. doi: 10.11569/wcjd.v20.i34.3366
人肠道病毒71型VP1和VP4的抗原融合表达及鉴定
冷弘, 王娜, 王媛媛, 臧文巧, 李敏, 赵国强
冷弘, 洛阳职业技术学院免疫学与病原生物学教研室 河南省洛阳市 471000
王娜, 王媛媛, 臧文巧, 李敏, 赵国强, 郑州大学基础医学院 河南省郑州市 450001
冷弘, 高级讲师, 主要从事病原生物学诊断方面的研究.
作者贡献分布: 此课题由赵国强设计; 冷弘、王娜、王媛媛、臧文巧及李敏操作完成; 数据分析由冷弘与王娜完成; 论文写作由冷弘、王娜及赵国强完成.
通讯作者: 赵国强, 教授, 450001, 河南省郑州市科学大道100号, 郑州大学基础医学院. zhaogq@zzu.edu.cn
收稿日期: 2012-09-26
修回日期: 2012-11-09
接受日期: 2012-11-23
在线出版日期: 2012-12-08
Abstract

目的: 构建人肠道病毒71型(human enterovirus 71, EV71)VP1-VP4重组融合蛋白表达体系.

方法: 构建EV71 VP1-VP4重组融合蛋白原核表达载体转化大肠杆菌DH5α, 诱导表达融合蛋白VP1-VP4, SDS-PAGE和Western blot法进行鉴定. 用融和蛋白包被ELISA板检测41例已知血清.

结果: 重组片段VP1-VP4测序结果与设计目的片段序列相符, 重组载体构建成功; SDS-PAGE显示融合蛋白约42.8 kDa, 与预期值一致; Western blot提示该融合蛋白可以和EV71 VP1、VP4抗体特异性结合. 融合蛋白包被ELISA板能准确检测出41例血清中16例EV71阳性血清, 与CA16无交叉反应.

结论: 表达的EV71 VP1-VP4融合蛋白具有良好的抗原性, 可作为EV71感染检测抗原, 为EV71诊断试剂和疫苗的研究奠定实验基础.

Keywords: EV71; VP1, VP4; 融合抗原; 融合PCR